微生物遗结合转移.pptVIP

细菌质粒的接合转移 —— 三亲本杂交 实验原理：1、质粒的转移性 细菌的遗传重组有接合转移、转化和转导三种主要方式。 接合转移是指供体和受体细胞间直接接触，质粒DNA从供体向受体转移的过程。 质粒可分为可转移质粒和非转移质粒两类，转移质粒带有完整的编码转移酶的 tra 基因,质粒能自主地从一个细胞转移到另一个细胞,甚至还能带动供体细胞的染色体 DNA 向受体细胞转移，这类质粒常被称为自主转移质粒。如大肠杆菌的 F 质粒。 有些质粒不含 tra 基因,但含有质粒转移起始位点oriT，虽不能自主转移，但能被其他一些含完整 tra 基因的质粒所诱动,这类质粒又被叫做可诱动质粒。 实验原理：2、本实验所用供体质粒 本实验中要转移的质粒是pHN102，它是在广宿主范围的稳定载体pTR102 中插入生物发光酶基因luxAB 构建而成。 pTR102中带有含 par 基因的稳定性片段（stabillty）,它能在较多革兰氏阴性细菌中稳定存在，它含有质粒转移起始位点oriT，不含完整的转移基因 tra，必须在含有 tra 基因的辅助菌株诱动下， pTR102 才能从供体菌向受体菌转移。 为有效筛选转移接合子 (transconjugant), pHN102 质粒上带有 Tc 抗性和生物 发光酶基因( lux