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死后脏器标志性蛋白、体液、离子成分变化 国内有研究者研究死后尸体组织PH值变化与死亡时间的关系[11]，死后骨骼肌FTIR 光谱 变化与死亡时间的关系[12]，玻璃体液变化与死亡之间的关系[13]等 此外很多先进技术也不断的得到引进应用，比如红外技[14]术、核磁共振技术[15]、CT扫描技术等[16]，现代分子生物学方法，RT-PCR[17]等。 目前有关溺亡尸体溺亡时间的研究甚少，溺亡尸体比一般死亡尸体更为复杂，环境恶劣，尸体长时间浸泡水中，容易发生腐败，水中微生物影响。 本研究拟通过建立不同溺亡时间大白兔模型,分析大白兔心肌、骨骼肌病理组织学随溺亡时间推移的变化特征，同时western-bot分析心肌、骨骼肌肌球蛋白、肌钙蛋白降解规律并探讨其与溺亡时间的关系，为法医推断尸体溺亡时间提供数据。 溺亡较比一般死亡有其特殊性，溺亡常常伴随尸体高度腐败，判断溺亡性质虽然有多种措施，比如硅藻检验等。 虽然普通死亡时间的推断研究国内外研究众多，也有很多技术不断的得到更新应用，但是溺亡时间的判断仍然研究甚少。 随着分子生物技术的不断发展，新一代蛋白质组学技术面世，同位素相对标记与绝对定量技术（iTRAQ技术[10]）是近年来新开发的一种蛋白组学定量技术，iTRAQ试剂盒能对蛋白质水解的多肽进行标记，采用串联质谱法，可精确定量鉴定肽段，能得到500-600种差异表达蛋白。与一般蛋白质学方法而言，iTRAQ技术串联质谱能大规模筛选鉴定差异表达蛋白，对差异蛋白进行绝对定量。 基于上述原因，本课题拟采用iTRAG技术大规模筛选肝脏蛋白差异定量分析变化与死亡时间的关联性，并选择筛选出来的一两种标志性蛋白采用常规western技术及PCR技术对其进行实验验证分析，为法医界推断死亡时间基础研究提供大量数据，并逐渐应用与实践工作。 完毕 谢谢 溺亡尸体心肌、骨骼肌肌组织病理学变化及球蛋白、肌钙蛋白降解与溺亡时间相关性实验研究 PPT 目录 1、选题依据和科学意义 2、研究目标和研究内容、拟解决关键问题及预期结果 3、研究方法和主要技术路线 4、可行性论证 5、可能遇到的困难及拟解决办法 6、工作进度安排 7、经费预算 一、选题依据和科学意义 死亡时间（postmortem interval PMI)又称死后间隔时间，是指发现尸体距离检查尸体的时间间隔，死亡时间的准确判断具有重要的法医学价值，为公安部门侦破案件提供有力证据，也一直是法医学中研究的重点和难点。 溺亡较比一般死亡有其特殊性，溺亡常常伴随尸体高度腐败，判断溺亡性质虽然有多种措施，比如硅藻检验等。 虽然普通死亡时间的推断研究国内外研究众多，也有很多技术不断的得到更新应用，但是溺亡时间的判断仍然研究甚少。 一、选题依据和科学意义-国内研究动态 随着现代科技的不断发展，法医检验技术也在不断的提高，推断死亡时间的研究也在不断推进： 刘良教授率先采用图像分析DNA降解与死亡时间的关系； 国内学者研究看家基因GAPDH及β-actin mRNA降解与死亡时间的关系； 随后有国内学者研究肝脏糖原变化与死亡时间的关系； 心肌骨骼肌肌动蛋白降解规律与死亡时间的关系； 此外还有利用玻璃体液变化、角膜厚度判断死亡时间的研究； 应用红外技术检测耳温推断死亡时间的研究。 一、选题依据和科学意义国外研究动态 死亡时间的推断一直是国内外法医工作者的研究热点和难点； Banaschak 等H-MRS技术对死后猪的大脑代谢分解产物推断研究死亡时间； 应用核磁共振技术对死亡组织细胞代谢物质进行精确判断，以推断死亡时间； Philip C研究死后骨骼肌PH值变化与死亡时间的关系； 死后机体体液变化推断死亡时间也有研究： 有研究发现死后氯化物、钾、钠与死亡时间之间存在较好的双对数关系； 脑脊液成分复杂，死后人体脑脊液中14 种蛋白成分呈规律性升高； 有研究证实尿液中的血管性假血友病因子，含量随死亡时间延长而规律性升高，且与死亡原因无关。 二、研究目标和研究内容、拟解决关键问题及预期结果 1、研究目标 比较不同时间溺亡大白兔心肌、骨骼肌形态学变化，HE染色组织病理学变化；western-blot法检测大白兔心肌、骨骼肌肌球蛋白、肌钙蛋白含量变化规律，以此建立其与溺亡时间的关系。 研究目标 2、研究内容 （实验一）不同溺亡时间大白兔心肌、骨骼肌组织形态学及HE染色病理学检查 （1）大白兔溺亡模型建立：选取健康体重均匀的大白兔18只，随机实验组各16只、对照组2只，采用常规窒息法水中窒息大白兔并浸泡30min,6h,12h, 24h