体外抗原抗体反应概.ppt

掌握：抗原抗体反应的原理及特点 前带、后带、亲合性、亲合力的概念 熟悉：影响抗原抗体反应的因素 了解：抗原抗体反应的基本类型 补体参与的反应：抗原抗体复合物可激活、固定补体，利用补体的溶细胞效应测定抗体或抗原。 中和反应：病毒或外毒素。 免疫标记技术：用荧光素、放射性物质、酶、胶体金、生物素等标记抗原或抗体,以检测相应的抗体或抗原。 * 第七章 抗原抗体反应 （2009级检验） 授课：微生物学与免疫学教研室 沈小波 目的要求 抗原抗体反应----抗原与相应抗体的特异性结合反应 Ag Ab 抗原（Antigen） 抗体(Antibody) Ab Ag 体外 体内 第一节 抗原抗体反应的原理 抗原抗体反应的特异性：基于抗原抗体两种分子间的结构互补性和亲和性。 第一阶段： Ag-Ab发生特异性结合 第二阶段： 出现肉眼可见反应 反应分两个阶段 Ab Ag + - 范德华力 疏水作用力 （最主要） 氢键结合力 H2O 静电引力 H H - + + - O N N O 一、抗原抗体结合力 Ag1 Ag1 Ab1 Ag1 Ag1 Ab1 在抗原和抗体分子一方或双方均以单效价存在的情况下，两者之间的结合力——亲和性 在抗原和抗体分子均以双效价或多效价存在的情况下，两者之间的结合力——亲合力（多价优势） 二、抗原抗体的亲和性和亲和力 Keq = 104 Affinity 106 Avidity 1010 Avidity 亲合力 多个抗原决定簇与多价抗体间的总结合力 可逆性 特异性 比例性 第二节 抗原抗体反应的特点 1、高度特异性（specificity) 抗体 CDR 抗原 抗原决定簇 Ab Ag 抗原抗体反应的特异性是指抗原分子上的抗原决定簇和抗体分子超变区结合的特异性，由这两个分子间空间结构的互补性决定。 交叉反应 ——两种不同的抗原具有部分相同或类似结构的抗原决定簇，可与彼此相应的抗血清（抗体）发生反应。 2、比例性(proportionality) 抗原与抗体发生可见反应需要一定的量比关系，只有二者浓度比例适当时，才形成较大的抗原抗体结合物。 Ab Ag 沉淀物总量 抗原浓度 前带 等价带 后带 等价点：最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比。 带现象：因抗原抗体比例不合适而不出现可见反应。 [Ag] + [Ab] [AgAb] [AgAb]结合常数） [Ag][Ab]（解离常数） K = 3、可逆性(reversibility) 影响因素：1、亲和力；2、环境因素 第三节 影响抗原抗体反应的因素 一、反应物自身的因素 1、抗原：理化性状、表面抗原决定簇的种类和数量 2、抗体：来源、与抗原合适的比例、特异性、亲和力和亲合力 第三节 影响抗原抗体反应的因素 二、反应环境条件 1、电解质:才能形成大块复合物 2、pH值 3、温度 4、适度的震荡 第四节 抗原抗体反应的类型 凝集反应 沉淀反应 补体参与的抗原抗体反应 中和反应 免疫标记技术 抗原抗体反应的类型 沉淀反应： 可溶性抗原 相应抗体 凝集反应： 颗粒性抗原 相应的抗体 （可溶性抗原吸附于与免疫无关的颗粒性载体上） 适量电解质 肉眼可见的 沉淀反应 适量电解质 肉眼可见的凝集块 *