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人正常尿路移行上皮细胞无血清培养-医药英语 [真诚为您服务] 关键词：细胞学技术；细胞，培养的 摘要目的建立一种比较简便的人正常尿路上皮细胞无血清培养方法。方法标本组织块用冷消化法分离出尿路上皮细胞，培养于无血清生长培养基。观察传代细胞形态及生长情况，并用TGF-β1抑制细胞增殖试验检验细胞在有血清或无血清培养基中对TGF-β1的反应。结果培养的总成功率为73%，细胞具有典型的移行上皮细胞形态学特征，细胞能在24小时后增殖进入对数生长期，传代9～11次后开始衰退。另外，无血清培养体系比含血清培养体系更能反映出TGF-β1对细胞抑制作用。结论此培养体系具有简单、短期内可扩增出大量纯净上皮细胞、应用范围广和培养成功率高的特点。 Cultureofhumannormalurothelialcellswithserum-f reemedium TANGYang，CHANGJiwu，SUIZhifang etal.DepartmentofUrology，TheSecondhospital，TianjinUrologicalInstitute，Tianjin300211 AbstractObjectiveToestablisharelativesimpleandconvenientserum-freeculturemethodofhumanunthelialcells.MethodsEpithelialcellswereisolatedfromsampletissuebycoldtrypsinizationandculturedinserum-freegrowthmedium.Growthandmorphologyofpassagedcellswereobserved.Moreover，cellsreactingtoTGF-β1waschekedwithTGF-β1inhibitingcellgrowthtestinserum-freeorcontainingserummedium.ResultsTotalsuccessfulrateofculturewas73%.Culturedcellshadtypi calmorphologicalfeaturesoftransitionalepitheliumandrapidlyproliferatedintologarithmgrowthperiod.After9～11passages，cellsbegansenescence.Thechangesofcellproliferationinserum-freemediumratherthanserumcontainingmediumreflectedtheTGF-β1effect.ConclusionsThisculturesystemwassimpleandconvenient，amplifyingalotofpureepithelialcellsinshorttermwithmoreapplicabilityandhighsuccessfulculturerate. KeywordsCytologicaltechnicsCells，cultured 培养人正常尿路移行上皮细胞对熟悉移行细胞分化和增殖机制，深入了解膀胱肿瘤成因和用组织工程技术构建人工膀胱是不可缺少的研究手段［1，2］。人正常尿路移行上皮细胞被公认为是较难培养的上皮细胞之一［3］，对培养的微环境要求高［4］。目前细胞培养中常用含血清培养基，但由于血清成分复杂，许多精细的实验研究要求培养基中不含有血清，使含血清培养体系的应用受到一定限制。现迫切需要建立一个相对简 便的无血清培养体系，不仅培养的成功率高，而且适用于诸如TGF-β1抑制细胞增殖等有关细胞因子调控细胞生长的精细实验。我们进行了以下研究。 材料与方法 一、标本来源 经病理证实为肾癌、前列腺增生、先天性输尿管肾盂连接部梗阻患者的肾盂、输尿管或膀胱组织。患者平均年龄46岁。男性31例，女性17例。新鲜标本放于4℃细胞无血清培养基，可放置长达12小时而不致明显影响细胞活性。同时取部分组织作为石蜡切片，病理学检测证实无增生及恶变。 二、主要试剂 无血清细胞生长培养基：17.7gMCDB153，牛垂体提取物50mg，CaCl2H2O0.13mg，氢化可的松0.074mg，胰岛素0.005mg，T30.067mg溶于1L双蒸水，调节pH值至7.2；人重组TGF-β1；大豆胰蛋白酶抑制剂，以上试剂购于Sigma或Gibco公司。 三、尿路上皮细胞的原代和传代培养 采用冷消化法将标本的上皮层与间质分开［5］，加入大豆胰蛋白酶抑制剂终止消化。调整细胞数量1～2×105个/ml无血清生长培养基。在40ml玻璃培养瓶中加3～4ml