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医学疫学实验课件
医学免疫学实验 第3次 免疫标记技术细胞免疫体外检测 录像(免疫标记技术) ELISA(操作,间接法检测抗-HBs) E-花环试验、淋巴细胞转化试验、大、小吞噬细胞(示教) 酶联免疫吸附试验Enzyme-Linked Immunosorbent Assays (ELISA) 用酶标记抗原(或抗体)检测抗体(或抗原)。 检测敏感度:ng/ml 固相载体: 聚苯乙烯微量反应板 标记酶 辣根过氧化物酶(HRP) 碱性磷酸酶(AP) 酶标仪读OD值 间接ELISA法检测血清抗-HBs 步骤 加血清及对照 第1孔,阴性对照,加阴性对照血清1滴 第2孔,阳性对照,加阳性对照血清1滴 第3孔,待检血清,加待检血清50?l 第4孔,空白对照 加酶结合物 每孔加入酶结合物1滴(空白孔不加),混匀,封板,37?C 30min 洗板 弃去孔内液体,洗涤液注满各孔,静置5 sec,甩干,重复3次。 显色 每孔加显色液A、B各1滴,混匀,封板,37 ?C 15min 观察结果 免疫细胞功能检测 E花环形成试验 淋巴细胞转化试验 大、小吞噬细胞 * Immunofluorescence, IF Sandwich ELISA indirect ELISA *
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