免疫血液自动的化检测风险的评估和确认研究的.doc

实用标准文案 精彩文档 实验室质量控制 免疫血液自动化检测 风险评估和确认研究 免疫血液实验室检测已经从经典试管法的 1.1 ABO血型 方法学发展为应用各种技术和方法的自动 化系统。自动化系统可提高免疫血液检测 的效率，如缩短报告周转时间、结果解释 的标准化等。但免疫血液检测自动化要求 实验室在投入常规使用前对其进行风险评 估和确认/验证活动。 ABO血型测定是检测待检者血液红细胞上有无A和/或B抗原、和血浆或血清中有无抗A和/或 抗B抗体，前者称为正定型，后者称为反定型。ABO血型检测的原理是缺乏某种特定抗原的 个体，其血清内必定具有相应的抗体。这些抗体是天然产生的、可预期的抗体，称为ABO 同种血凝素，由抗-A、抗-B和抗-A,B组成。未实现自动化之前，常规ABO定型试验常采用 经典的试管离心法，无需孵育。表1展示了最常见的血型反应组合。当正定型和反定型结 果不符合时，应暂停ABO血型检测的结果发放和解释，调查不符合的原因。 首先，实验室必须明确自动化系统的性能要 求。性能要求可来源于当地和/或国家法规 要求，也可以是试验的临床用途确定。第 二，实验室应选择厂家声明能满足规定性能 要求的自动化系统。最后实验室需确认/验 证自动化系统符合厂家声明。只有完成以上 步骤，自动系统才可用于常规检测。 表1 血液定型试验和预期反应 正定型 反定型 ABO 存在的抗原 存在的抗体 抗A 抗B A细胞 B细胞 O A 无A和B抗原 A抗原 抗-A、抗-B、抗-A,B 抗-B 抗-A 无 B抗原 A和B抗原 注：“-”为阴性反应，“＋”为阳性反应。 一、免疫血液检测 1.2 Rh血型 1. 血型检测 Rh血型鉴定是指用抗-D试剂检测红细胞上有无D抗原。D抗原是Rh血型系统中的一个成员， 目前Rh系统包括46种抗原，其他的主要抗原有C、c、E、e。根据检测方法，D抗原检测可 能也需要试剂对照，这种情况下，对照液应包含与抗-D血清相当的蛋白质，通常为试剂中 除了抗-D以外的惰性成分，以检测红细胞的自发性凝集导致的假阳性结果。 血型检测指测定待测血液中有无血型抗 原，通常用抗血清检测特定红细胞抗原， 通过红细胞与抗血清的特异性反应表明有 或无相应抗原。例如，红细胞标本与抗A血 清反应表示有A抗原，即A+。血型检测有多 种方法，没有一种特定的抗血清或技术能 保证检出所有罕见、微弱或变异的抗原， 因此要谨慎选择最适合实验室特定要求和 标准的试剂和方法。 某些个体的D抗原表达减弱，其可能原因是是抗原位点的减少（弱D或Du抗原），也可能是 细胞外D表位的缺失（部分D抗原）。采用直接凝集法，用抗-D试剂检测这些个体的红细 胞时有可能出现假阴性结果。习惯上，弱D抗原指D抗原和抗D试剂在离心或37℃孵育后不 产生直接凝集反应，而仅与抗人免疫球蛋白试剂产生凝集反应。弱D试验在受血者中的作 用还不是那么肯定，但在供血者和D阴性母亲生的新生儿中弱D或部分D的检测是非常重要 65 实验室质量控制 的。这种新生儿需进行Rh免疫球蛋白预防 溶血。同样没有一种单独的方法或试剂能 通过直接凝集反应检出所有的D变异型，实 验室应审查试剂说明书或用户手册，明确 其能否适用本实验室要求的弱D试验。 性，应进行直接抗球蛋白试验。实验室应 自己确定用于明确抗体特异性的抗原阳性 和抗原阴性的试剂红细胞数目和组合。 自动化系统中，抗原抗体反应可能采用光 学/数字分析。通过比较红细胞的反应模式 和已建立的阈值，确定反应为阳性（+）、 阴性（-）或不确定性（？）。然后将反 应与程序化逻辑相比，得到检测结果的解 释，如表2和表3所示。 4. 交叉配血 血清学交叉配血试验为受血者血浆和供血 者红细胞之间的反应，是检出ABO不相容性 及临床上有意义的抗体的过程。如果抗体 筛查试验未检出抗体，且病人无特定抗体 过去史，则选择合适的ABO和Rh血型的红细 胞单位进行输血，可采用快速离心血清学 交叉配血检测ABO不相容性。如果检测到个 体有临床意义的抗体或者有同种抗体的过 去史，应选择无相关抗原的红细胞进行输 血。在这种情况下，血清学交叉配血方法 必须能检出有临床意义的同种抗体引起的 不相容。这些方法应包括37℃孵育阶段和 抗人球蛋白试验。实验室有责任明确此试 验的当地或国家法规要求。 1.3 其他红细胞抗原 其他红细胞抗原（表型）包括C（Rh2）、 c（Rh4）、E（Rh3）、e（Rh5）、JKa （JK1）、K（KEL1）等，目前多通过自动 化检测方法完成，后者适用于大量标本的 筛查。需要标本特殊红细胞抗原鉴定试验 的情况有：1）患者标本，以支持抗体鉴 定；2）供血者，为同种免疫性疾病患者输 血选择抗原阴性的红细胞单位。并非所有 的自动化系统都能进行RBC特殊抗原鉴定， 用户必须审查使用手册明确