应用MALDI-TOF-MS检测原发性肝癌骨转移患者血清的多肽差.PDFVIP

肿瘤2012 年8 月第32 卷第8 期　TUM OR Vol. 32, August 2012　　 643 DOI: 10.3781/j .issn.1000-7431.2012 .08.014 Copyright© 2012 by TUM OR Clinical Research 临床研究· 应用MALDI-TOF-MS检测原发性肝癌骨转移患者血清的多肽差异谱 陈　兵，何　健， 曾昭冲，杜世锁，杨　平 复旦大学附属中山医院放疗科，上海　200032 [摘要]　目的：应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 （matrix -assisted laser desorption ionization-time of flight mass spectrometry ，MALDI-TOF-MS ）系统分析原发性肝细胞癌 （hepatocellular carcinoma ，HCC ）骨转移患者 血清多肽差异谱，寻找具有潜在诊断意义的血清分子标志物。方法：收集 50 例 HCC 骨转移患者和 50 例 HCC 未 骨转移患者的血清，分成训练组 （76 例）和验证组 （24 例）。所有样本分别经 ClinProt 磁珠纯化、MALDI-TOF- MS 检测及 ClinProTools 软件进行血清多肽差异谱分析。应用液相色谱质谱联用的方法对差异多肽进行序列鉴定。 应用径向基神经网络 （radial basis function neural network ，RBFNN ）算法建立诊断模型，并对诊断模型进行单盲 P （W ilcoxon-test ）＜ 0.001] 的多肽峰， 法实验验证。结果：HCC 骨转移患者中，共获得 10 条差异有统计学意义 [ 并成功鉴定了其中7 条肽段 （质荷比分别为 1 780.7、1 866.5、2 131.6、2 880.4、1 532.4、2 489.8 和 2 234.3 ）的氨基酸 序列，这些肽段的来源蛋白分别为甲胎蛋白（alpha-fetoprotein ）、凝血酶原（prothrombin ）、丝甘蛋白聚糖（serglycin ）、 交联 -α- 胰蛋白酶抑制物 H4 重链异构体 2 （isoform 2 of inter-alpha-trypsin inhibitor heavy chain H4 ）、 自噬相关 β 蛋白16-2 异构体 1 （isoform 1 of autophagy-related protein 16-2 ）、转甲状腺素蛋白 (transthyretin) 和纤维蛋白 链 （fibrinogen beta chain ）。选取 2 组间统计学差异最显著的6 条多肽峰 （质荷比分别为 1 535.4、1 780.7、1 866.5、2 131.6、 2 880.4 和 2 901.9）建立的诊断模型的识别率为 89.47%，预测率为 82 .89% ；单盲法验证模型的灵敏度为 83% ，特异 度为 92% 。结论：筛选获得的差异血清多肽可能成为潜在的诊断 HCC 骨转移的分子标志物。 [关键词]　肝肿瘤；血清；肽类；基质辅助激光解析电离飞行时间质谱；肿瘤分子标志物 [中图分类号]　R735.7 [文献标志码] A [文章编号]　1000-7431 (2012) 08-0643-07 Differential serum peptide profiling of patients with bone metastasis from primary hepatocellular carcinoma using MALDI-TOF-MS CHEN Bing, HE