课件：降压物质检查法.ppt

回肠肌营养液的制备 A 液：试验当日，取氯化钠160.0g、氯化钾4.0g、氯化钙（按无水物计算）2.0g、氯化镁（按无水物计算）1.0g 与磷酸氢二钠（含12 个结晶水）0.10g，加注射用水700ml 使溶解，再加入注射用水适量，使成1000ml。 B 液：取硫酸阿托品0.5mg、碳酸氢钠1.0g、葡萄糖（含1 个结晶水）0.5g，加适量注射用水使溶解，加A 液50.0ml，混合后加注射用水使成1000ml。B 液应临用前配制，并在24h 内应用。 检查法 取健康合格的成年豚鼠，雌雄均可，雌者无孕，体重250～350g，禁食24h，迅速处死，将血排净。立即剖腹取出回肠一段（选用远端肠段，该段最敏感），注意避免因牵拉使回肠受损，必要时仔细分离肠系膜。剪取2～3cm长，用注射器抽取上述溶液B，小心冲洗出肠段的内容物。将肠段下端固定于离体器官恒温水浴装置的浴槽底部，上端用线与肌张力换能器相连；浴槽中事先放入一定量的B 液（约10～30ml），通入95％O2和5％CO2的混合气体，维持恒温（34～36°C），用适当方法记录回肠收缩曲线。如果使用杠杆，其长度应能使肠段的收缩放大约20 倍。选择1g 的预负荷，可根据其灵敏度加以调节。回肠放入浴槽后，静置15～30min，方可开始注入药液。每次注入药液前，要用B 液冲洗浴槽3 次（最好是溢出，而不排空浴槽）。相邻两次给药的间隔时间应一致（约2min），每次给药前应在前一次反应恢复稳定后进行。 取对照品稀释液和供试品溶液，照下列次序准确注入浴槽：dS、dT、dT、dS、dSH，如dSH 所致的反应值大于dS 所致反应值时判定试验有效。如供试品溶液引起回肠收缩，则分别计算dS、dT 所致反应的平均值。若dT 所致反应的均值不大于dS 所致反应的均值，即判定供试品组胺类物质检查符合规定；若dT 所致反应的均值大于dS 所致反应的均值，即判定供试品组胺类物质检查不符合规定。如供试品不引起回肠收缩，则在供试品溶液中加入组胺对照品高、低剂量，并按下列次序准确注入dSH、dS+T、dSH+T、dS, 重复一次，若供试品组胺溶液产生的收缩与对应组胺对照液高、低剂量的收缩基本一致，可判定供试品组胺类物质检查符合规定；若供试品组胺溶液产生的收缩与对应组胺对照液高、低剂量产生的收缩不相符，即减少或无收缩，或不能重复出现，则此检查结果无效，应进行供试品的降压物质检查。 * 降压物质检查法DEPRESSOR SUBSTANCES 省药品检验所 内容提要 基本概念和原理 2010年版增修订内容 检查法 欧洲药典降压物质检查法 组胺类物质检查法 基本概念和原理 ?检验目的 组胺、缓激肽一类的物质具有血管扩张作用，超过一定剂量会使血压快速降低，对人体产生危害。 来自动物或微生物发酵提取物及生产过程中有可能混入此类物质的原料，应建立降压物质检查项，如抗生素、氨基酸、多肽等。 来自动植物、微生物发酵提取物及生产过程中有可能混入组胺类或类组胺类物质的注射剂(静脉），应建立降压物质检查项。如抗生素、中药注射剂、氨基酸、多肽类等。 基本概念和原理 降压物质检查法定义：本法系比较组胺对照品（S）与供试品（T）引起麻醉猫血压下降的程度，以判定供试品中所含降压物质的限度是否符合规定 本法原理是利用猫对组胺样物质具有较为敏感的作用，通过静脉给予一定剂量的供试品，观察对麻醉猫血压的影响，以判定供试品中降压物质的限度是否符合要求。 2010年版增修订情况 历史沿革 1985年版药典至现行药典（2005年版）方法基本一致 2005年版动物去掉了狗（5kg以上） 2010年版修订 2010 版与2005版区别 2010版 2005版 1、经验证保持活性符合要求的条件下 如无沉淀析出 2、制备 配制 3、按品种项下规定的限值，且供试品溶液与对照品稀释液的注入体积应相等的要求，制备适当浓度的供试品溶液。 按品种项下规定的限量，配成适当浓度的供试品溶液。试验时，一般要求供试品溶液与对照品稀释液的注入体积应相等 2010 版与2005版区别 4、一般为13.3～20.0kPa 一般为13.3~16.0kPa 5、每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行，且相邻两次注射的间隔时间应尽量保持一致 相邻两次注射的间隔时间应一致（3~5分钟），每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行 6、则判定 即认为 修订背景 1、强调对照品的降压活性要符合要求 2、强调猫的正常血压范围为13.3~20.0kPa 3、强调每次注射应在前一次反应恢复稳定以后进行，而不强调要3~5分钟之内。 检查法-材料 1 血压记录装置： 生物机能实验系统（多导生理记录仪），相应的传感器，血压计（定标用） 2 动脉插管（细的硬塑