REACH法规第四卷译稿子子-25.docVIP

实用标准文案 精彩文档 B.24. 老鼠的现场测定 1. 测定方法 1.1. 引言 见总体引言部份 E 。 1.2. 定义 见总体引言部份 E 。 1.3. 参考物质 无。 1.4. 测定的测定方法原则 测定中将发育中的老鼠胚胎与化学药物接触，研究的是正在发育的后代数目中的成黑素细胞和对照组毛发颜色的基因。发育中的后代数目是许多对照组毛发颜色基因的杂合体。成黑素细胞基因中占主导地位的遗传突变因子的异变或减少导致遗传细胞的隐性表现型表现为显性，结果产生了皮毛上有不同颜色斑点的老鼠 。记录有斑点的和变异后代的数目及出现的频率，并与仅受溶剂作用的后代数目的后代相比较。斑点鼠实验通过研究后代数目来推测生物体的变异情况。 1.5. 质量标准 无。 1.6. 测定方法描述 准备 尽可能使测定物质溶解或悬浮于生理盐水中。不溶于水的化学物质使之溶解或悬浮合适的促溶剂中。促溶剂应既不干扰测定物质也不产生毒性。测定物质应为新制的。 动物样品 T 标记的老鼠(非刺鼠,a/a;南美栗鼠,粉红的眼睛,cchp/cchp;褐色,b/b;浅色的,短耳朵,d se/d se;杂色斑点,s/s) 和HT标记的老鼠交配(苍白的,非刺鼠,brachypody,pa bp/ pa bp;暗色绒毛,ln fz/ln fz;........pe/pe ) 或和C57BL标记的老鼠(非刺鼠,a/a)交配。如果 NMRI(非刺鼠,一/一;白公,c/c) 和 DBA 之间(非刺鼠,一/一;褐色,b/b;稀释的 d/d) 杂交可以产生非刺鼠后代，则这种杂交也可作为一种合适的杂交方式被使用。 数量和性别 足够的受孕雌鼠为不同剂量水平的实验提供适当数目的存活后代。合适的样本规模受实验中斑点鼠的数目和对照组实验数据的比例。应使迎阴性实验数据结果的比例在最高剂量水平下至多为1/300。 阴性和阳性对照组 仅受溶剂作用的老鼠与对照组应保持一致。 记录的相同的实验室的对照组实验数据若一致可增加实验的灵敏度。测定的敏感提供它们是同种的。 如果一种化学物质经测定没有可引起变异性却在本实验中表现为可变异性，则在同一实验室中在这种化学物质作用下可获得最新的有阳性对照组。 施药测定方法给药途径 用药的常用测定方法是用管子插入怀孕雌鼠口中或注入起腹腔中。若合适，还可使吸入药物或其他用药测定方法。 配制不同剂量水平的药物 至少要用二个剂量水平的药物且包括一种能显示毒性的或降低繁衍能力的药物。对于非毒性化学药品应用其最大的可使用的剂量。 实验步骤 单个实验通常在怀孕第8，9或10天，以发现阴道鞘状塞子似物质为第一天算起。这些天对应于第7，25，8，25和9，25天，这些天应连续测定。 分析 幼鼠在出生后的在三到四个星期之间被区别标记为三个不同的层次: 变异起因于的腹腔中部 5 毫米里面的吞噬细胞的被白色标记 黄色的，刺鼠类,斑点在乳和生殖器官, 咽喉, 腋窝和鼠蹊部区域和在前额中部相关的地方是由无区别(MDS)引起的； 有色的和白色的斑点无规则分布的则认为是由细胞的变异（RS）引起的；所有的三种除了最后一种与基因有关的细胞变异外均需标记，MDS和RS间的微小区别可用荧光显微镜观察样本毛发来区分。 应标明肉体形态明显异常的后代。 2. 实验数据 记录标记后代的总数和有一个或多个预测细胞变异斑点的后代的数目。用合适的测定方法比较药物作用下和阴性对照组的实验数据。实验数据也表明了个体繁衍的基础。 3. 实验结果报告 3.1. 测定结果报告 测定结果报告应尽可能包含下列各项实验数据: 杂交的亲代血统实验中使用的动物的种类； 实验和对照组下各含有的怀孕雌鼠数目； 实验和对照组下的平均出生数和存活数； 测定化学药品的剂量水平 (s), 所用溶剂； 实验进行的第几天怀孕； 实验测定方法； 标记后代的总数及实验条件和无药物处理条件下产生 WMVS ， MDS 和 RS 的数目； 形态异常后代的数目； 产生RS变异情况和剂量关系, 统计的评估, 结果的讨论, 结果的解释。 3.2. 实验结果评估和解释 4. 参考文献 见总体引言部份 B 。 B.25. 老鼠遗传性变异测定 1. 测定方法 1.1. 引言 见总体引言部份 B 。 1.2. 定义 见总体引言部份 B. 1.3. 参考物质 无。 1.4. 测定方法原理 老鼠可遗传变异测定发现哺乳动物后代数目中染色体的结构和数目变化并可在子一代中复原。 这种被观察的染色体变异是可以相互遗传的，并且雌性后代的X染色体会减少。含有传递物质的个体和XO-雌鼠的F1代的细胞遗传分析，表明其生殖能力下降。某种传递（X-常染色体间和c-t类间）会引起完全不孕。遗传信息的传递可由细胞生物学原理，通过研究亲代雄鼠或子一代雄鼠或子一代雌鼠的雄性后代的成熟细胞有丝分裂的间期至第一次分裂中期，观察得