课件：细菌药敏试验及其耐药表型检测.ppt

* jhindler CLSI Taiwan Nov 08 * 葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法 4.0 μg/ml 红霉素 0.5 μg/ml 克林霉素 No growth = 无诱导性克林霉素耐药 生长=诱导性克林霉素耐药 对于红霉素耐药，克林霉素敏感的葡萄球菌，需检测诱导性克林霉素耐药 注意 试验适用于金葡菌和凝固酶阴性葡萄球菌(苯唑西林敏感和耐药株)； 对于CoNS，该试验不必常规开展因为克林霉素很少用于治疗凝固酶阴性葡萄球菌； 大多数医院相关MRSA是克林霉素耐药的； 大多数社区相关MRSA是克林霉素敏感的(msrA 基因型)； 克林霉素可以口服给药。 万古霉素中介耐药的金黄色葡萄球菌（VISA） 耐药是由于： 增厚的细胞壁 检测 困难；表型不稳定 菌落形态 不典型金葡菌 万古霉素敏感 万古霉素中介 细胞壁 MRSA (not VISA) VISA 血琼脂上48小时生长 当有以下一个或多个情况时菌株可疑为VISA ?-內酰胺类药物的MIC降低 达托霉素MIC升高 菌落形态不典型（一些为微小菌落） 肉汤中生长迟缓（如血培养） 凝固酶反应微弱/延迟 经过几次次代培养后： 菌落回复为典型形态 万古霉素MIC降低并且菌株变为万古霉素敏感 万古霉素耐药的金黄色葡萄球菌（VRSA） 耐药是由于 从万古霉素耐药肠球菌（VRE）中获得vanA基因 美国报道例数 9个患者 检测 大多数标准方法均可检测 菌落形态 典型金葡菌 vanA从VRE转至金葡菌 vanA 纸片扩散法折点葡萄球菌-万古霉素 CLSI 文件 Susceptible敏感 Intermediate中介 Resistant耐药 M100-S18 2008 ?15 - - New!新 M100-S19 2009* - - - CLSI M100-S19. Table 2C. 对于金黄色葡萄球菌 *假如抑菌圈≥7 mm，用MIC法检测万古霉素（若有需要） 万古霉素纸片扩散法仅在检测携带van-A金葡菌（VRSA）时可信；需确证没有抑菌圈 (≤6 mm) 纸片扩散法不能鉴别VSSA和VISA 纸片扩散法不能检测凝固酶阴性葡萄球菌 肠球菌高水平氨基糖苷类耐药筛查 纸片扩散法 120 μg 庆大霉素; 300 μg 链霉素 ? 10 mm = 无高水平氨基糖苷类耐药 MIC筛查 庆大霉素: 500 μg/ml 链霉素: 1000 μg/ml (肉汤) 2000 μg/ml (琼脂) 肠球菌氨基糖苷类修饰酶 链霉素 庆大霉素 妥布霉素 阿米卡星/丁胺卡那 6-AAD + - - - 3’APH - - - + 2”APH/6’AAC - + + + 6’AAC* - - + + * 在所有屎肠球菌中均发现 + = 酶可以修饰药物；药物无协同性 - = 酶不能修饰药物；药物有协同性 万古霉素耐药肠球菌（VRE）表型 VRE－屎肠球菌中居多 vanA - 高水平耐药(MIC ? 256 μg/ml) vanB - 中等水平耐药 (MIC 16 - ? 256 μg/ml) 低水平万古霉素耐药 vanC - (MIC 2 - 16 μg/ml) vanC天然存在于鹑鸡肠球菌和铅黄肠球菌 菌株不引起院内爆发，vanC基因不易于传播 纸片扩散法实验可能检测不出 VRE 菌种 基因型 动力 MGP* 有意义否? 粪肠球菌 vanA or vanB - - 是 屎肠球 vanA or vanB - - 是 ** 铅黄肠球菌 vanC + + 否 鹑鸡肠球菌 vanC