枯草芽胞杆菌信号分子的分离纯化.PDFVIP

中国农学通报 2018,34(26):42-47 中国农学通报 2018 Chinese Agricultural Science Bulletin Chinese Agricultural Science Bulletin 枯草芽胞杆菌信号分子的分离纯化 1 1 1,2 1,2 1,2 纪晓磊 ，李昆达 ，高冬妮 ，平文祥 ，葛菁萍 1 （黑龙江大学生命科学学院微生物省高校重点实验室，哈尔滨150080； 2 黑龙江大学农业微生物技术教育部工程研究中心，哈尔滨150500） 摘 要：为获得较高纯度的B.subtilis分泌的信号分子，并研究其对L.paracaseiHD 1.7 产细菌素的作用，本 研究采用中空纤维系统与离子交换层析对信号分子进行分离纯化。利用SDS检测信号分子的纯 度及表观分子量，并采用抑菌试验分析信号分子对L.paracaseiHD 1.7 产细菌素的作用。结果表明以pH 4.0 的NaAc + NaCl 溶液作为洗脱液时出现3 个洗脱峰，抑菌试验表明添加洗脱峰P3 的L.paracasei HD 1.7 抑菌能力较原始菌株提高了11.31% ，而添加洗脱峰P 1和P2 的L.paracaseiHD 1.7 抑菌能力较原始 菌株没有提高。因此，P3 为含有信号分子的目的洗脱峰，SDS电泳验证洗脱峰P3 为单个条带。 最佳层析条件：离子交换层析洗脱液（B 液）为pH 4.0 的NaAc+ NaCl 溶液，平衡液（A 液）为pH 4.0 的 NaAc 溶液，洗脱流速为2 mL/min 。SDS验证表明在5 kDa 左右出现单个条带，抑菌试验结果表 明层析液中的B.subtilis信号分子能促进L.paracaseiHD 1.7 产细菌素。 关键词：枯草芽胞杆菌；信号分子；分离纯化；离子交换层析；细菌素 中图分类号：Q935 文献标志码：A 论文编号：cas SeparationandPurificationofSignalMoleculesofBacillussubtilis 1 1 1,2 1,2 1,2 JiXiaolei,LiKunda,GaoDongni ,PingWenxiang ,GeJingping 1 (KeyLaboratoryofMicrobiology,LifeScienceCollege,HeilongjiangUniversity,Harbin150080; 2AgriculturalMicroorganismsTechnologyEducationEngineeringResearchCenter,Harbin150500) Abstract: Toobtainhigh-puritysignalmoleculessecretedby B.subtilis andtoexploretheeffectonthe bacteriocinproducedbyL.paracasei HD1.7,thesignalmoleculeswereseparatedandpurifiedbyhollowfiber systemandionexchangechromatographyinthisstudy.SDSwasusedtodetectthepurityandapparent molecularweightofsignalmolecules.Theeffectofsignalmoleculeson L.paracasei H