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菌种操作规程 （Master Operation Procedure for ARA Production Strain） CA/WA001—2004版 1目的 建立菌种操作规程，确保菌种保藏、自然选育、生产供种操作规范性，提供优质高产的生产菌种。 2 范围 生产一部菌种组。 3 责任 菌种组操作人员负责本操作规程的实施。 安瓿管的制备 空白安瓿管的制备 安瓿管有三种：手榴弹形、球形、直形。任意选取一种放于重铬酸钾-浓硫酸溶液（100g/mL）中浸泡10h，然后取出用自来水反复冲洗多次，最后用蒸馏水洗二次，烘干。将写有菌种编号及制备膜的标签放入安瓿管内，将有字的一面向管壁，塞上棉塞，121℃灭菌1小时。 脱脂牛奶的制备 将买来的新鲜牛奶倒入离心管中以3000转/分离心15分钟，去掉上层的脂，下层即为脱脂牛奶。 脱脂好的牛奶倒入试管（Φ18×200mm）或250mL三角瓶中，置消毒锅中灭菌，灭菌温度110℃、时间20分钟。 按10%的抽样率抽取灭菌好的脱脂牛奶作无菌实验，每支肉汤倒入约1mL左右的牛奶。然后置37℃恒温间培养48h观察肉汤变化情况，判定是否染菌，如无染菌，即可使用。 孢子悬浮液的制备 将经过摇瓶考察指标符合要求对照的斜面孢子，制成高浓度的孢子悬浮液，用无菌的毛细吸管或注射器将菌液分装于安瓿管底部，每管装0.3～0.5mL 预冻及速冻 灌装好