第五课绿色食品产品标准.ppt

西北民族大学生命科学与工程学院 绿色食品识别 识别绿色食品应通过“四位一体”的外包装。“四位一体”是指：图形商标、文字商标、绿色食品标志许可使用编号和绿色食品防伪标同时使用在一个包装产品上。 是绿色食品的特征。 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 1.检测的基本原理 在一定条件下，有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶的正常功能有抑制作用，其抑制率与农药的浓度呈正相关。在正常情况下，酶催化神经传导代谢产物(乙酰胆碱)水解，其水解产物与显色剂反应，产生黄色物质，用分光光度计在412nm处测定吸光度随时间的变化值，计算出抑制率，通过抑制率可以判断出样品中是否含有高剂量有机磷或氨基甲酸酯类农药。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 2.试剂 pH8.0缓冲溶液；分别取11.9g无水磷酸氢二钾与3.2g磷酸二氢钾，用l000mL蒸馏水溶解。 显色剂：分别取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氢钠，用20mL缓冲溶液溶解，置4℃冰箱中保存 底物：取25.0mg硫代乙酰胆碱，加3.0mL蒸馏水溶解，摇匀后置40C冰箱中保存备用。保存期不超过两周。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 3.仪器 分光光度计、常量天平。 4.分析步骤 (1)样品处理 选取具有代表性的蔬菜样品，冲洗表面泥土后，剪成1cm左右见方的碎片，称取样品1.0g，放入烧杯或提取瓶中，加入5mL缓冲溶液，振荡1～2min，倒出提取液，静置3～5min，待用。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 (2)对照溶液测试 先于试管中加入2.5mL缓冲溶液，再加入0.1mL酶液、0.1mL显色剂，摇匀后于37℃放置15min以上(每批样品的控制时间应一致)。加入0.1mL底物摇匀，此时检液开始显色反应，应立即放入分光光度计比色池中，记录反应3min的吸光度变化值Ao。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 (3)样品溶液测试 于试管中加入2.5mL样品提取液，其他操作与对照溶液测试相同，记录反应3 min的吸光度变化值At。 (4)结果计算及判定方法 抑制率(％)：[(Ao—At)/40]×100％ 式中： Ao——对照溶液反应3min，吸光度的变化值； At——样品溶液反应3min，吸光度的变化值。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 当蔬菜样品提取液对酶的抑制率≥50％时，表示蔬菜中有高剂量的有机磷或氨基甲酸酯类农药存在，样品为阳性结果。阳性结果的样品需要重复检验2次以上。并可再用其他方法进一步确定具体农药品种和含量。酶抑制率法技术指标如表3-23所示。 在检出的抑制率≥50％的30份以上样品中，经气相色谱法验证，阳性结果的符合率应在80％以上。 第五节 绿色食品生产技术标准 表3-23 酶抑制率法对部分农药的检出限 单位：mg/kg 0.05 呋喃丹 3.0 乐 果 0.2 敌百虫 4.0 马拉硫磷 0.05 丁硫克百威 2.0 甲胺磷 0.1 灭多威 0.3 辛硫磷 5.0 甲基异柳磷 1.0 对硫磷 0.8 氧化乐果 0.1 敌敌畏 检出限 农药名称 检出限 农药名称 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 5.说明 葱、蒜、萝卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中，含有对酶有影响的 植物次生物质，容易产生假阳性。处理这类样品时，可采取整株(体)蔬菜浸提。对一些含叶绿素较高的蔬菜，也可采取整株(体)蔬菜浸提的方法，减少色素的干扰。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸酯类农药快速检测技术 (二)农药残毒的快速检测一酶抑制率分光光度法 5.说明 当温度条件低于37℃，酶反应的速度随之放慢，加入酶液和显色剂后放置反应的时 间应相对延长，延长时间的确定，应以胆碱酯酶空白对照测试3min的吸光度变化Ao值在0.3以上，即可往下操作。 第五节 绿色食品生产技术标准 二、有机磷和氨基甲酸