利用农杆菌介导法获得转jpt基因半夏植株-IAPB.PDFVIP

第 28卷 第 6期 华 中 农 业 大 学 学 报 Vo1．28 No．6 2009年 12月 JournalofHuazhongAgriculturalUniversity Dec．2009，664~ 668 利用农杆菌介导法获得转 jpt基因半夏植株 王新颖 文晓鹏一 胡 鹏 (贵州省农业生物工程重点实验室，贵阳 550025) 摘要 以贵州珍珠半夏Pinelliaternate(Thunb．)Breit为材料，采用根癌农杆菌介导法，探索了影响半夏 遗传转化效率的主要因子。结果表明，卡那霉素的最佳筛选浓度是 100mg／L，侵染时问、共培养时间、乙酰丁香 酮浓度对转化频率都有一定的影响。其中侵染时间为20min，共培养时间为3d，乙酰丁香酮的浓度控制在6O～ 100mg／L时可以有效提高遗传转化效率。在此基础上辅以超声波处理 5min，可以有效提高叶柄转化的瞬时表 达率。对抗性转化植株进行Gus染色和PCR检测，结果表明外源基因ipt已经整合到半夏基因组中。 关键词 半夏