高迁移率族蛋白1介导的炎症反应在动脉粥样硬化进展的作用及机制研究-内科学（心血管病）专业论文.docxVIP

解放军医学院硕士学位论文英文缩略词表 解放军医学院硕士学位论文 英文缩略词表 缩略词 英文全称 中文名称 HMGB 1 High Mobility Group Box 1 高迁移率族蛋白1 AS Atherosclerosis 动脉粥样硬化 APOE叫‘ apolipoprotein E gene knockout 载脂蛋白E基因敲除 EP Ethyl pyruvate 丙酮酸乙酯 Receptor for advanced glYca‘i。n end RAGE 晚期糖基化终产物受体 products TLR2 Toll—like receptor 2 Toll样受体2 TLR4 Toll-like receptor 4 Toll样受体4 MCP．1 Monocyte chemoattractant protein 1 单核细胞趋化蛋白 TNF．0【Tumor necrosis factor Cc 肿瘤坏死因子0【 THP一1 Human acute monocytic leukemic cell line 人单核细胞白血病细胞 PMA Phorbol ester 十四烷酰佛波醇乙酸酯 oxLDL Oxidized low density lipoprotein 氧化型低密度腊蛋白 IL-1 p Interleukin 1 p 白细胞介素1 D 万方数据 解放军医学院硕士学位论文作 解放军医学院硕士学位论文 作 者：肖湖南 学科专业：内科学(心血管病) 导 师：刘宏斌教授 高迁移率族蛋白1介导的炎症反应在动脉粥样硬化进展的作用及 机制研究 中文摘要 研究背景与目的：动脉粥样硬化炎症是导致斑块进展及斑块不稳定的重要因素。 高迁移率族蛋白1(HMGBl)可以通过多条途径促进炎症发展。本研究的目的是 研究探讨HMGBl介导的炎症对斑块进展的作用及机制。 方法：(1)8周龄SPF级C57BL／6雄性小鼠12只以及C57BL／6系ApoE-／-雄性小 鼠12只分别作为对照组及实验组，每组分为两个亚组，早中期组(10周高脂饮食) 八／、一 及晚期组(20周高脂链盒)。10周、20周后处死小鼠，主动腾塞鲞盗望曼旦量油—，—、，一， 红。染色评估斑块大小，巨噬细胞免疫组化染色用{墨焦垦型田胞：÷整脉窦石 蜡切片用于HMGBl免疫组化染色检测HMGBl 随机分为对照组及实验组．实验组每日给予腹腔 (EP，50mg／Kg)，对照组每日给予等量生理盐水。12周高脂饮食后，麻醉处死小鼠， 血清测定血脂水平，主动脉窦冰冻切片用于油红O染色评估斑块大小，巨噬细胞 免疫组化染色用于评估巨噬细胞含量；HMGBl免疫组化染色及western blot用于 检测HMGBl表达。RT-qPCR检测HMGBl受体TLR2、TLR4，单核细胞趋化因 子MCP．1和肿瘤坏死因子TNF．0【的mRNA表达水平。(3)THP一1细胞经佛波酯 (PMA，100ng／m1)刺激分化为巨噬细胞，分别与oxLDL(50mg／L)及oxLDL (50mg／L)+EP(5mmol／L)共培养24h后取细胞爬片油红0染色评估脂质吞噬 情况，免疫组化评估HMGBl在细胞内表达情况，RT-qPCR检测炎症因子白细胞 介素1D(IL一1p)。 结果：(1)HMGBl在正常小鼠主动脉中主要表达在内皮细胞胞核，在ApoE．／一小．o一／～ 鼠主动脉动脉粥样硬化斑块中，妄要烘塑蜘鸱、臣篮烈包，够细胞胞’、-_，， ～ ＼ 2 万方数据 解放军医学院硕士学位论文核亦有表达： 解放军医学院硕士学位论文 核亦有表达： 早中期动脉粥样硬化的HMGBl的表达高于晚期动脉粥样硬化 ．■二—～——————————————————————————一 HMBGl的表达(O．05+0．007 VS．0．02士0．005，P0．05)：晚期动脉粥样硬化斑块面积 比高于早中期动脉粥样硬化斑块面积比(0．40士0．03 VS．0．25士0．02，P0．05)。(2) HMGBl表达抑制组HMGBl表达减少85％，HMGBl表达抑制组斑块面积 (289845士2645％m2 VS．499247士4588％m2．P0．05)及斑块面积比(22．7％士2．1％VS． 39．1％士3％．P0．05)明显减少，斑块内巨噬细胞含量降低(11．3％土8％VS． 39．24％士13．85％．P0．05)，TLR2、TLR4、MCP．1、TNF．0【mRNA的表达水平分别 降低59％，39％，47％，45％。(3)oxLDL可以诱导巨噬细胞表达HMGBl及IL一113， 丙酮酸乙酯能够抑制oxLDL诱导的巨噬细胞HMGBl及IL-1D的表达，可减少巨 噬细胞吞噬脂质(4．89％士0．8％VS．8．44％+1．2％，，P0．05)