GB/T 14643.3-1993工业循环冷却水中粘泥真菌的测定　平皿计数法.pdf

中华人民共和 国国家标准 工业循环冷却水中粘泥真菌的测定 GBIT 14643.3一93 平 皿 计 数 法 Industrialcirculatingcoolingwater-Examinatonof slimeformedfungi-Standardofplatecount 1 主题内容与适用范围 本标准规定了循环冷却水中粘泥真菌的测定方法。 本标准适用于工业循环冷却水中粘泥真菌的测定，也适用于原水、生活用水及其他水中粘泥真菌的 测定。 2 引用标准 GB603化学试剂 试验方法中所用制剂及制品的制备 GB6682分析实验室用水规格和试验方法 3 方法提要 本法采用25号浮游生物网收集循环冷却水中的粘泥，所得的粘泥用石英砂充分研磨使细胞分散， 再利用平皿计数技术在29士1℃培养72h来测定粘泥中真菌总数。 4 试剂和材料 本测定方法中，除特殊规定外，应使用分析纯试剂和符合GB6682中三级水规格的水。 4.1马铃薯:市售新鲜(无芽)，去皮后切成约20mmX20mmX20mm小块; 4.2 I6萄糖(HG3一1094); 礴3 琼脂:生物试剂; 4.4 石英砂:21。一150fcm(70-100目); d.5氛化钠(GB1266); 4.6 乳酸; 4}7 乙醇(GB678),750a(VIV)溶液; 4.8 牛皮纸; 49 医用脱脂棉; 4.10 医用脱脂纱布。 5 仪器和设备 51无菌箱(室)或超净工作台; 52 蒸汽压力灭菌器; 5.3 ’上化培养箱; 国家技术监督局1993一08一06批准 1994一07一01实施 GB/T 14643.3一93 5.4 鼓风电热干燥箱:温度可控制在(60-280)士2`C; 5.5 铝锅 :0200mm; 5.6 25号浮游生物网; 5.了转子流量计((0-2m'/6); 58 瓷研钵; 519 搪瓷量杯:1OOOmL; 5.10 磨口三角瓶:IOOOmL; 5.11培养皿:090mm; 5.12 容量瓶,1OOOML; 5.13 刻度吸管:1mL; 5.14 刻度吸管;5mL; 5.15 三角瓶:5OOmL; 5.16 量筒:SOOmL; 5.17 量筒:25mL, 6 试验前的准备 6.1 培养基的制备 称取约200g的马铃薯于铝锅中，加水约1OOOML于电炉上加热，煮沸10min并不断搅拌，趁热用 四层医用脱脂纱布过滤于搪瓷量杯中，收集到约900mL滤液，滤液搅匀待用。 于L述滤液中加入20.Og琼脂和20.Og葡萄搪，并放在电炉上加热，不断地搅拌，待琼脂完全溶化 后，趁热用四层医用脱脂纱布过滤，待滤液不再滴出时，用水补充至IOOOmL，并用乳酸调节pH至4.0 士。.I，并分装在500mL三角瓶中，每瓶分装量不超过其总量的三分之二，塞上棉塞再用牛皮纸把瓶口 包好，用蒸汽压力灭菌器于121士1℃灭菌15min, 62 无菌稀释水的制备 6.2.1生理盐水的配制:称取8.5g氯化钠，溶解在IOOOmL水中，混匀。 6.2.2将生理盐水(6.2.1)分装在1OOOmL磨口三角瓶中，每瓶45mL，每个三角瓶塞子和瓶口间插入 一小纸片，塞紧瓶塞，每个瓶子的瓶口均用牛皮纸包扎以防污染，用燕汽压力灭菌器于121士1℃灭菌 15min. 6.3 刻度吸管的灭菌 6.3，将洗净并烘干后的吸管粗端塞上医用脱脂棉，棉花量要适宜，长度大约10-15mm,棉花量不宜 露在口外，多余的棉花可以用火焰烧掉。 6.3.2每支刻度吸管用一条约40^-50mrn宽的牛皮纸条，以45。左右角度螺旋形卷起来，吸管的尖端 在头部，粗端将多余的纸条折叠打结，不使散开，标上量度，若干支捆成一束，置电热干操箱中于160土 2'C灭菌 2h. 6.4 培养皿的灭菌 将洗净并烘干后的培养皿10个左右叠在一起，用牛皮纸卷成一简，置电热干操箱中于16。士2℃灭 菌Zh 65‘石英砂的灭菌 将洗净并烘干后的石英砂装入磨口三角瓶中，按(6.2.2)包扎，灭菌。 了测定步骇 7，样品的采集 71.1采集粘泥的装