TFF1在肺癌中表达和作用研究.PDFVIP

江医学2015 年第37 卷第4 期 TFF1 在肺癌中的表达及作用研究 刘开泰 陆妙珍 褚宇东 【摘要 】 目的 研究三叶因子1（TFF1 ）在肺癌组织及肺癌细胞 中的表达、甲基化状态及其功能。 方法 选取98 例非 小细胞肺癌患者手术切除的肺癌组织，采用 RT-PCR 、MSP 检测TFF1 在肺癌组织中的表达与甲基化状态，分析其与患者临床特 点的相关性，以及检测肺癌细胞 H23 、H1299、L78 、H446 、H157 及95D 中TFF1 的表达和甲基化状态以及5-aza-2-deoxycy- tidine（DAC ）处理后细胞 中TFF1 表达的变化。TFF1 转染 H23 细胞 ，MTT 法及克隆形成实验检测其增殖能力和克隆能力的变 化，细胞凋亡实验及Western blot 检测凋亡相关蛋白Caspase3 表达水平。 结果 TFF1 在肺癌组织中的甲基化率为56 .1% （55/98 ）。TFF1 甲基化与肺癌患者的TNM 分期和淋巴结转移显著相关（P 0 .001 ）。TFF1 在 H23 和H157 中无表达，在 H1299、 H446 及95D 中表达较低，在 L78 中表达较高。DAC 处理后，细胞 TFF1 表达的变化分别为表达恢复（H23 、H157 ），表达增强 （H1299 ，H446 ，95D ）和无明显改变（L78 ）。恢复表达TFF1 后，H23 细胞 的增殖及克隆形成能力明显减弱（P 0 .05 ），细胞凋亡 率和凋亡相关蛋白Caspase3 活性片段的表达明显增加。 结论 TFF1 在肺癌组织中的甲基化状态与肺癌的TNM 分期和转移 密切相关。TFF1 在肺癌细胞中的表达受DNA 甲基化的调控。肺癌细胞 H23 中恢复表达TFF1 可以抑制其增殖和克隆能力，促 进其凋亡。 【关键词】 TFF1 肺癌 DNA 甲基化 表观遗传学 Expression and methylation status of TFF1 in lung cancer China 【Abstract 】 Objective To investigate the expression and methylation status of Trefoil factor 1(TFF1) in lung cancer tis- sues and lung cancer cell lines. Methods Expression and methylation status of TFF1 in 98 non-small cell lung cancer (NSCLC) tissues and lung cancer cell lines (H23, H1299, L78, H446, H157 and 95D) were detected by RT-PCR and methylation specific PCR (MSP) , respectively . The changes of TFF1 expression was also examined after the lung cancer cell lines treated with 5-aza-2-deoxycytidine(DAC). After H23 cells were transfected with TFF1 gene, the variation of proliferation and cloning ability of H23 cells was examined with MTT assay and colony formation, respectively . The apoptosis H23 cells was also determined and the expression of Caspase3 was detected with Western blot after transfection. Results The methylation rate of TFF1 in lung can- cer tissues was 56%(55/98). TFF1 methylation was significantly correlated with TNM stage and lymph