药学 分第04章 蛋白质.ppt

蛋白质的化学 第一节   蛋白质是生命的物质基础 一、什么是蛋白质? 蛋白质(protein)是由许多氨基酸(amino acids)通过肽键(peptide bond)相连形成的高分子含氮化合物。 二、蛋白质的生物学重要性 1. 蛋白质是生物 体重要组成成分 分布广：所有器官、组织都含有蛋白质；细胞的各个部分都含有蛋白质。 含量高：蛋白质是细胞内最丰富的有机分子，占人体干重的45％，某些组织含量更高，例如脾、肺及横纹肌等高达80％。 蛋 白 质 的 分 子 组 成The Molecular Component of Protein 组成蛋白质的元素 主要有C、H、O、N和S。 有些蛋白质含有少量磷或金属元素铁、铜、锌、锰、钴、钼，个别蛋白质还含有碘 。 ? 蛋白质元素组成的特点 由于体内的含氮物质以蛋白质为主，因此，只要测定生物样品中的含氮量，就可以根据以下公式推算出蛋白质的大致含量： 二、蛋白质结构的基本单位 存在自然界中的氨基酸有300余种，但组成人体蛋白质的氨基酸仅有20种，且均属 L-氨基酸（甘氨酸除外）。 （四）氨基酸的分离与分析 常规方法：层析法、溶解度法、等电点法、特殊试剂沉淀法、离子交换法等。 氨基酸自动分析仪 高效液相色谱法 离子交换层析法 生物质谱 毛细管电泳 蛋 白 质 的 分 子 结 构The Molecular Structure of Protein 三、肽 思考：自然界组成蛋白质的氨基酸只有20种，为什么构成的蛋白质有成千上万？ 顺序异构体三肽有6种 20种不同氨基酸构成的分子量为2600的蛋白质，其异构体数目为2×1018 对于分子量34000的蛋白质，含有12种氨基酸，且每种数量相同，其异构体数目约为10300。 （二） 几种生物活性肽 1. 谷胱甘肽(glutathione, GSH) 二、蛋白质的构象 蛋白质的构象是指蛋白质分子中各种原子和基团在三维空间上的排列、分布及肽键的走向。 蛋白质的构象又称空间结构、立体结构、高级结构和三维结构。 蛋白质的构象与功能体现所必需。 蛋白质构象经常包括：二级结构、三级结构与四级结构。 （一）维持蛋白质构象的化学键 维持蛋白质构象的化学键主要是一些次级键，亦称副键。 这些次级键键能较小，稳定性较差。 其种类有：氢键、疏水键、盐键、配位键、二硫键、Van der Waals力。 5、无规线团 蛋白质二级结构中除上述有规则的构象外，尚存在因肽键平面不规则排列的无规律构象，称为自由折叠或无规线团。 三、蛋白质和多肽合成的基本原理 化学合成法、半合成法、生物合成法 1、化学合成法的基本原理 ①氨基酸的基团保护 氨基保护【苄氧碳酰氯(Cbz-Cl)，H2/Pd或钠-液氨法去除；叔丁羰酰氯(BOC-Cl)，用稀盐酸去除】 羧基保护：常用无水乙醇酯化，以后碱水解除去。 ②多肽液相合成 （1）基团保护 （2）用接肽缩合剂缩合（N,N′-二环己基羰二亚胺（DCCI） （3）肽化合物的合成 ③多肽的固相合成 2、采用生物技术合成蛋白质 基因工程 细胞工程 酶工程 一、蛋白质分子的大小、形状及分子量的测定 蛋白质是高分子化合物，分子量1×104～1×106D或更高。 形状，在溶液中形状常为球形、椭球形和纤维状。 分子量测定方法： ①分子筛层析法 ②SDS电泳 ③生物质谱 * 蛋白质的凝固作用(protein coagulation) 蛋白质变性后的絮状物加热可变成比较坚固的凝块，此凝块不易再溶于强酸和强碱中。 3. 酚试剂反应 在碱性条件下，蛋白质分子中的酪氨酸、色氨酸可与酚试剂（含磷钨酸与磷钼酸化合物）生成蓝色化合物。 4. 其它显色反应 七、蛋白质的免疫学性质 1、抗原 2、抗体 3、蛋白质免疫行政的应用 3、蛋白质分子引起280nm光吸收的最主要成分是 A．肽键 B．半胱氨酸的一SH基 C．苯丙氨酸的苯环 D．色氨酸的吲哚环 E．组氨酸的咪唑环(异吡唑环) 4、变性蛋白质的特点是 A．黏度下降 B．丧失原有的生物活性 C．颜色反应减弱 D．溶解度增加 E．不易被胃蛋白酶水解 5．蛋白质变性是由于 A．蛋白质一级结构改变 B．蛋白质空间构象的改变 C．辅基的脱落 D．蛋白质水解 E．以上都不是 6、已知卵清蛋白pI=4.6，β乳球蛋白pI=5.2，糜蛋白酶原pI=9.1，上述蛋白质在电场中的移动情况为 A．缓冲液pH为7.0时，糜蛋白酶原向阳极移动，其他两种向阴极移动 B．缓冲液pH为5.0时，卵清蛋白向阳极移动，其他两种向阴极移动 C．缓冲液pH为9.1时，糜蛋白酶原在原地不动，其