微生物学试验十一十二微生物学试验十一.PDF

1 微生物學實驗十一微生物學實驗十一 、十二十二 微生物之生化性質測試微生物之生化性質測試 生化八管生化八管 2 •• 葡萄糖發酵性革蘭氏陰性桿菌鑑定流程葡萄糖發酵性革蘭氏陰性桿菌鑑定流程 接種8管培養基 TSIA(slant) 、CIT(slant) 、URE(slant) 、 SIM((broth)) 、VP （Semi-Solid ）、 ORN(broth) 、ARG(broth) 、LYS(broth) 3 IMVViCC Tesest •• I:I: indoleindole ((引朵引朵))反應反應((第四管第四管)) • M: (MR) methyl red甲基紅反應 • Vi: (VP) Voges-Proskauer反應(第五管) • CC: (Cit(Citratte)) 檸檬酸反應檸檬酸反應((第二管第二管)) 4 I: indole (引朵)反應(第四管) 某些微生物可產生某些微生物可產生 tryptophanasetryptophanase ，，將胺基將胺基 酸 tryptophan水解產生 indole 與 pyruvic acid 以Kovacs’ reagent偵測 p -dimethylamino benzaldehyde + butanol + HCl 酸化的 butanol可將 indole 萃取出，再與p - dimethylamino benzaldehyde反應產生紅色化 合物合物 (b(brothh上層上層)) 5 Trypyptopophan hydydroolysysiss 培養基： SIM agar – 左左 ：：positivepositive ((EE. colicoli)) – 右： negative 6 •• SulfideSulfide-IndoleIndole-MotilityMotility MediumMedium （（SIMSIM ）） Indole test = 陽性陽性 ：紅色紅色 。 陰性：黃色或無色。 Motility tese = 陽性陽性 ：擴散生長且混濁擴散生長且混濁 。 陰性：生長固定於接種線上。 PIA=PIA= SIMSIM上層出現棕褐色環上層出現棕褐色環 MR-VP-Test 7 ((Meethyyl-reded tesest)) ((第五管第五管)) 葡萄糖葡萄糖是所有腸內微生物是所有腸內微生物 ，，用來氧化產生能量用來氧化產生能量 的 主要碳源 ，但因各別微生物的特殊酵素代謝 途徑不同途徑不同 ，，所產生的最終產物也不盡相同所產生的最終產物也不盡相同 以甲基紅作為酸鹼指示劑以甲基紅作為酸鹼指示劑 ，用來測試大量酸性用來測試大量酸性 產物的生成 甲基紅在 pH 6.2 以上時呈黃色 ，在pH 4.2 以下則轉 變成 紅色 8