红曲菌的分类鉴定及其固态发酵产孢条件的优化-制药工程专业论文.docxVIP

天津科技大学 天津科技大学 l哪舢l帅㈣㈣删㈣洲 学位论文原创性声明 Y3030541 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。 除文中特别加以标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体己经发表或撰写的成 果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本 文研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的 法律后果由本人承担。 作者签名：蔫骶 日期：勘fy年侈月／汐日 知识产权和专利权保护声明 本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研究经费支持下完成 的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技大学；所涉及的创 造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后，以本论文数据和资 料发表论文或使用论文工作成果时署名第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声 明的法律后果由本人承担。 作者签名：葛锪艮 日期：秽≤年6月少日 学位论文版权使用授权书 本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家 有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布论文的全部或部分内容，允许论文被 查阅和借阅。本人授权天津科技大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进 行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密I l(请在方框内打“√”)，在 年解密后适用本授权书。 本学位论文属于 不保密．1 I(请在方框内打“、／”)。 作者签名：雨．梭髟 日期：砂年，劬日 导师签名：／矽堡 日期：多矾厂年i月／伯 万方数据 摘 摘 要 红曲菌(胸，嬲c螂)是一种典型的丝状真菌，广泛应用于食品发酵、食品防腐、 食品添加剂和中药等方面。红曲茵能产生多种具有重要生理活性的次级代谢产物，但 其产生的桔霉素超标时会影响人体的健康。因不同种的红曲菌产桔霉素的能力差异很 大，对红曲菌种的分类鉴定十分重要。 目前对红曲茵固态产孢的报道较少，而孢子制剂可以用于红曲制品的工业化生 产。本论文从红曲发酵制品中分离得到红曲菌，通过形态学和分子生物学方法对红曲 菌进行鉴定，并对红曲菌的固态发酵产孢培养基组分和培养条件进行优化，并探讨了 红曲菌孢子制剂生产红曲米的可行性，为红曲制品的工业化生产提供参考，本研究开 展了以下工作。 首先从实验室中活化了保存的红曲菌17株，从红曲米样品中分离得到红曲菌16 株，共33株供试菌株，通过对菌株菌落形态和显微特征的观察，初步鉴定出供试菌 株中2l为株紫色红曲菌(肱矽唧“比搬)、3株为安卡红曲菌(必a力妇)、5株为发白 红曲菌(M口，6批)、4株为苍白红曲菌(M p口№，2s)，共分成四个种。 然后分别提取这些菌株的基因组，对其ITS区PCR扩增，将测序结果导入NCBI 进行比对并构建系统进化树。比对结果显示，供试菌株中21株为紫色红曲菌(M p“印“坨淞)、1l株为高粱红曲菌(M妇D，肠馏)o 对筛选出来的菌株进行糖化力、液化力、酯化力、色价以及产桔霉素情况进行检 测，得到6株(HQ20、HQ22、HQ23、HQ28、HQ31、HQ32)产桔霉素少且酶活较 高的菌株作为产孢优化的出发菌株。 通过单因素和正交试验，对红曲菌HQ31的固态产孢条件进行优化，确定了最佳 的产孢条件为：确定接种2．5×106个孢子到259以玉米芯粉作为底物基质的固态培养 基中，添加10％的蛋白胨，培养基初始pH7，料液比为l：1．5，28℃培养5天，得到最 佳的产孢结果为2．09×l 0 7个孢子儋。 利用最优产孢条件制备的孢子悬液进行接种，与传统的接种方法进行比较，制备 出的红曲米从色价、气味、感官等方面进行评价，结果表明，使用孢子液进行接种后 制备的红曲米的色价与传统方式接种的红曲米的色价接近，说明使用孢子液制备红曲 米的途径是可行的，并且保证了发酵过程的可控性。 关键词：红曲菌；分类鉴定；固态发酵：产孢 万方数据 ABSTRACTMonaScus， ABSTRACT MonaScus， a filamentous fmlgus， is埘dely used for food feⅡnentation， food preservation，food additives aIld Chinese traditional medicine．Ikcently，some metabolic porducts porduecdby MonaSeus haVe been shoWn with imporrtant physiological actiVitieS． Ho、Ⅳever，Monascus Species can produce citr