Hoxa5 Hoxb5基因在高氧致CLD新生大鼠中表达及其与肺泡上皮细胞损伤修复障碍的关系.docx

目 目 录 一、摘要 中文论著摘要 1 英文论著摘要 9 二、英文缩略语 19 三、论文 论文一 前言日U舌 O B “” ” ” “ ”2U20 材料与方法 2l 实验结果 22 讨论 · ··3l 结论 · ··34 论文二 前言刖舌 ”””一一”35 材料与方法 ： ··35 实验结果 40 讨论 · · · · ··49 结论 ·· · 51 论文三 前言刖吾 “ ”一””“ Q O 53 材料与方法 54 实验结果 59 讨论 · ····· ··· · ··78 结{仑 ····· · ··· ···· ·· 82 四、本研究创新性的自我评价 83 五、参考文献 84 六、附录 综述··· · ····· · ······ ·· · ·· · ··94 在学期间科研成绩 107 致谢····· 致谢····· · · ··108 个人简介 109 ·中文论著摘要·Hoxa5、Hoxb5基因在高氧致OLD新生大鼠肺中表达及 ·中文论著摘要· Hoxa5、Hoxb5基因在高氧致OLD新生大鼠肺中表达及 其与肺泡上皮细胞损伤修复障碍的关系 刖 舌 早产儿慢性肺疾病(chroniclungdisease，CLD)是早产儿长时间吸入高浓度氧 或机械通气治疗或感染后最常见的和最严重的并发症。早产儿CLD作为早产儿肺 透明膜病治疗的并发症在1967年首次被Northway描述，也称为支气管肺发育不 1是(bronchopulmonary dysplasia。BPD)。氧疗法是患有心肺疾病的早产儿最常应用的 一种治疗手段。这一措施虽可改变患儿的低血氧状态、挽救患儿的生命，但长期 吸入高浓度的氧气，可引起不同程度的肺损伤，严重者可发展为CLD。随着机械 通气的广泛开展、早产儿管理技术的日益提高及肺表面活性物质的普遍应用，使 早产儿，特别是超低出生体重儿(extremely low birth weight，ELBW) (出生体重 10009存活率有了明显改善，但随之而来的是早产儿慢性肺疾病发生率的提高， 国外已达30％．40％，国内也有上升趋势。由于尚缺乏有效的监控和防治手段，其 中10％．15％CLD患儿因严重肺功能障碍而死于呼吸衰竭，存活者也需长期依赖氧 气或机械通气治疗。 初期肺泡上皮细胞(alveolar epithelial cell，AEC)损伤和晚期肺纤维化是CLD 主要病理特征。以往的研究侧重阐明CLD的AEC损伤(坏死或调亡)及其损伤 后纤维组织替代AEC的病理过程及其可能机制，故目前多试图通过减轻AEC损 伤程度或减少肺组织胶原沉积而达到有效防止CLD的目的，但效果均不理想，至 今在CLD防治措施方面的研究进展缓慢。但恰是这种正常肺上皮重塑障碍后的不 可逆肺纤维化，严重影响了患儿的呼吸功能。那么损伤后的肺泡上皮为何不能完 全修复而被纤维组织替代呢?目前尚无答案。因此，我们设想如以研究高氧致CLD 中AEC的修复及其调控机制为切入点，可能是解决肺上皮重塑障碍的重要突破 口。 AEC包括I型肺泡上皮细胞(type AEC包括I型肺泡上皮细胞(type I alveolar epithelial cell，AEC-I)和II型 肺泡上皮细胞(type II alveolar epithelial cell，AEC-II)，已证实AEC—I为终末已 分化细胞，无再生、增殖及分化能力；目前研究证实AEC．II是AEC．I的干细胞 或祖细胞，如体外培养的AEC．II，可很快失去其特有的标志SPC(surfactant protein C)，而表达AEC-I的特有标志AQP5(aquaporin5)；用3H-TDR标记动物体内的 AEC．II，2天后在AEC．II临近发现标记的AEC．I等。由此可见，若肺上皮损伤 后，AEC．I无再生、修复能力，完全依赖AEC．II的增殖、分化方能完成正常的 肺上皮的重塑。 近年来，由于Hox基因(homeobox genes，Hox genes)在进化过程中的极大保守 性和其在动物胚胎发育分化中的作用，使之成为当今世界生命科学最热门的研究 领域之一。而有关Hox基因对正常肺组织发育及细胞分化调控作用的研究尚处起 步阶段。多数文献阐明不同簇的Hox基因在胎肺发育的特定阶段、特定部位表达， 对肺细胞系分化、成熟期重要作用，如HoxA5和HoxB5与支气管分枝形成，HoxB7、 HoxB8和HoxB5与肺芽发育密切相关。有个别报道HoxB5异常表达与先天性肺隔离 症、HoxA5过渡表达与原发性肺动脉高压、肺气肿发生有关。Hox基因对生后肺发 育的调控机制目前尚不清楚，生后肺组织中仍存在Hox基因，其中表达最强的是 HoxA5，其次是HoxB5