JAKSTT通路在HIV1胞内Tat蛋白激活卡波济肉瘤相关疱疹病毒裂解周期复制中的作用.docx

南京医科大学博士学位论文JAK／STAT通路在HIV-1胞内Tat蛋白激活卡波济肉瘤相关疱 南京医科大学博士学位论文 JAK／STAT通路在HIV-1胞内Tat蛋白激活卡波济肉瘤相关疱 疹病毒复制中的作用 中文摘要 人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficienzy virus type 1， HIV．1)感染显著提高卡波济肉瘤相关疱疹病毒(Kaposi’s sarcoma-associatedherpesvirus，KSHV)感染者发生卡波济肉瘤(Kaposi’s sarcoma，KS)的风险．KSHV感染是KS发生的必要条件，但在没有其 它协同因子作用时不足以引发KS，然而促使KsHv引发KS的因素还未完 全清楚。之前我们发现人类疱疹病毒6型(human herpesvirus type 6， HHV-6)是激活KSHV裂解周期复制的因素之一．本文应用实时荧光定 量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction， Real．time PCR)和免疫组织化学技术(immunohistochemistry assay，IHC) 分别检测原发性渗出性淋巴瘤【primary effusion lymphoma，PEL，又称 体腔淋巴瘤(boay cavity—based lymphoma，BCBL)1来源的BcBL—l细 胞中KsHv裂解期mRNA转录产物和病毒蛋白，证实HIV．1反式激活蛋 白(_transa_ctivative transcription protein，Tat)是KS致病机制中一种潜在 的重要因素．Tat可在转染细胞96 ll诱导ORF50(KSHV周期复制的开关 基因)，ORF26(编码KSHV次要衣壳蛋白)、ORF29(编码KSHV包装 相关蛋白)的mRNA转录水平分别升高到4．33士O．49倍(PO．05)、2．52 ±O．31倍(PO．05)和2．33 4-O．3倍(PO．05)，转染120 h分别升高到 1．9±O．26倍(PO．05)，1．82±0．264$-(P0．05)和1．5±0．224孝(P0．05)． 虫荧光素酶报告实验验证了Tat对ORF50启动子的作用，结果显示Tat不 南京医科大学博士学位论文能直接通过激活ORF50启动子来诱导KSHV复制．机制方面的研究证实， 南京医科大学博士学位论文 能直接通过激活ORF50启动子来诱导KSHV复制．机制方面的研究证实， 细胞内表达Tat*-]-诱导人白细胞介素(interleukin，IL)．6及其受体(IL一6 receptor alpha，IL一6Rct)的表达并活化信号转导子和转录激活子3(signal transducers and activators oftranscription，STAT)信号通路。以中和抗体 中和tdL．6或IL．6Ra、pXJanus激酶(Janus kinase，JAK)2抑制剂AG490 和显性负相sTAT3抑制STAT3信号通路均增强Tat诱导的KSHV复制。另 外，细胞内表达T8垃五诱导IL-4,x2．其爱体(IL-4 receptor alpha，IL-4Ra) 的表达并)g-,fESTAT6信号通路。显性负井flSTAT6抑制STAT6磷酸化可降 低Tat诱导的KSHV复制。以上研究结果表明Tat*-1-通过诱导KSHV复制提 高KSHV的病毒载量从而参与KS的致病机制；hlL一6／STAT3信号通路争 IL．4／STAT6信号通路在调控Tat诱导KSHV复制的过程中均发挥重要作 用。本研究结果提示JA，√STATeS．号通路对AIDS相关的KS患者的治疗有 一定意义。 关键词：HIVol Tat，卡波济肉瘤相关疱疹病毒，激活，JAK／STAT 南京医科走学博士学位论文Role 南京医科走学博士学位论文 Role of JAK／STAT Signaling in Reactivation of Kaposi’s Sarcoma—Associated Herpesvirus from Latency by Intraceilular Tat of Human Immunodeficiency Virus Type 1 Abstract Human immunodeficiency virus type 1 (HIV．1) infection significantly increases the risk of Kaposi’S sarcoma(KS)OCCUlTCllce in individuals infected with Kaposi’S sarcoma-associated herpes