抗癌复方硫酸不长春新碱脂质体给药系统分析.docx

四川大学博士学位论文抗癌复方硫酸长春新碱脂质体给药系统研究 四川大学博士学位论文 抗癌复方硫酸长春新碱脂质体给药系统研究 导师侯世祥教授 博士研究生 陈彤 论文摘要 “癌症”是临床上的一种常见病，亦是对患者生命安全威胁最大的一种 恶性疾病。目前，虽然有了手术疗法、放射疗法、化学疗法、生物医学疗法 等治疗手段，但癌症的防治远远不能达到人类健康的要求，甲．日攻克癌症亦 是当今人类的一种迫切希望。为了攻克癌症，医药工作者进行着不懈的努力， 不断提出新的治疗理论和治疗方法，早期化疗通常只用一种抗癌药物，但易 产生耐药性，且治疗效果不好，目前I临床化疗多采用联合化疗，即两种抗癌 药物甚至多种抗癌药物联合使用，联合化疗与仪使用单一抗癌药物相比，有 以下几个特点：可增加对癌细胞的细胞毒性；攻击癌细胞的不同生物化学靶 点；具有不同的抗癌作用机理，产生加和(或)协同作用：可同时作用于不 同生长周期的癌细胞；克服癌细胞的耐药性；联合化疗对正常细胞的毒性不 产生叠加毒性。因此，临床广泛采用联合化疗治疗癌症。 盐酸米托蒽醌(MT0)、硫酸长春新碱(VCR)是临床常用的两种化疗药 物，联合使用产生加和协同的抗癌作用，是临床治疗晚期乳腺癌．急性淋巴 性白血病、非何杰金淋巴瘤、骨髓瘤的常用联合化疗方案，疗效显著。 本课题首次提出将两种抗癌药物MT0和VCR同时包结于脂质体纳米粒给 药载体的构想，利用脂质体纳米粒给药系统的独特优势，用于癌症治疗。 为研究药物的包封率、泄露率、体外释药速率奠定基础，建立了同时定 量测定两种药物浓度的HPLC法，方法准确、新颖、简便、重现性好。 根据MTO和VCR的理化性质，以注射用大豆卵磷脂为材料，以体外释药 半衰期(T。：)和泄露率为指标，确定MT0一VCR—LP的制各工艺，分别以一级 动力学方程、Higuchi方程、Weibull方程对MTO—VCR．LP．1、 MTO—VCR—LP一2以及对照MTO和VCR水溶液(MTO．VCR-Soln)中VCR体 四JI『大学博士学位论文外释药数据进行拟合，MTO．VCR．LP．1中VCR的释药曲线以Weibull方程拟 四JI『大学博士学位论文 外释药数据进行拟合，MTO．VCR．LP．1中VCR的释药曲线以Weibull方程拟 合效果最好，Tl，2为6．82h，MTO．VCR-LP．2中VCR的释药曲线以Higuchi 方程拟合效果最好，Tl，2为2．22 h，MTO．VCR—Soln中VCR的释药曲线以 Higuchi方程拟合效果最好，T1，2为1．70 h。泄露实验结果为MTO-VCR—LP一1 中MTO在51d内几乎无泄露：VCR在11d内几乎无泄露，但在33d时渗漏率 达28．85％，在jld时渗漏率达79．82％；MTO—VCR—LP一2中MTO在5d时渗漏率 为11．88％，VCR在5d时渗漏率达95．35％。根据体外释药半衰期(T。)和泄 露率结果，确定了复方硫酸长春新碱脂质体(MTO-VCR—LP—1)的制备工艺。 采用逆向蒸发法合并pH梯度法制各MTO—VCR—LP，MTO—VCR—LP的平均粒径为 76．6lnm，Z一电位为一30．97mv，经Sephadex G-50葡聚糖凝胶柱分离，HPLC 法测定MTO的平均包封率达99．53％±0．34％(n：3)，载药量为2．5％± 0．10％(n=3)：VCR的平均包封率达95．77％±2．70％(n：3)，载药量为0．38％± 0．05％(n=3)。由于MTO—VCR—LP在33d时渗漏率达28．85％，在51d时渗漏率 达79．82％，故将其进行冷冻干燥，筛选出适宜的冻于剂为15％的蔗糖，所制 备的MTO—VCR—LP冻干均匀、疏松，具有良好的再分散性。 为测定体内生物样品中MTO和VCR的浓度，采用同一流动相，在不同波 长处，HPLC法分别测定体内生物样品中MTO和VCR的浓度，方法准确、新颖、 简便、重现性好。 为了考察MTO．VCR．LP的体内分布特性，进行了小鼠尾静脉注射 MTO—VCR—LP和MTO—VCR—Soln的体内分布实验研究，从动力学参数可以看出， 血浆中MTO—VCR—LP中MTO的AUC是．MTO—VCR—S01 rl的40．62倍，t。。。是MTO 原药的432倍：心、肝、脾、肺、肾中MTO—VCR—LP中MTO的AUC分别是 MTO—VCR—Soin中的0．72、2．73、1．79、0．48、0．47倍；血浆中MTO—VCR—LP 中VCR的AUC是MTO—VCR—Soin中2．78倍，t。。)是VCR原药的1．14倍，心、 肝、脾、肺、肾中MTO～VCR—LP中MTO的AUC分别是MTO—VCR—Sol rl中的0．57、 O．87、0．66、0．47和0．67倍。结果证实M