致泻性说大肠杆菌.ppt

致泻性大肠杆菌检验技术 河北省疾病预防控制中心 细菌寄生虫病防治与消毒所 甄素娟 概 念 大肠杆菌的部分血清型可引起肠道感染，称为致泻性大肠杆菌 致泻性大肠杆菌按照毒力因子、致病机理和流行病学特征分为5类 肠致病性大肠杆菌（EPEC） 肠侵袭性大肠杆菌（EIEC） 肠产毒性大肠杆菌（ETEC） 肠出血性大肠杆菌（EHEC） 肠聚集性粘附大肠杆菌（EAggEC） 生物学性状 形态 大肠杆菌是革兰氏阴性短杆菌，大小为1.0～1.5μm×2.0 ～6.0μm 多有鞭毛，约为4 ～6根，为周毛菌。没鞭毛的细菌也可使人或动物致病 大肠杆菌具有菌毛，分为性菌毛、普通菌毛和与致病性有关的菌毛。与细菌致病性有关的菌毛有：K88、K99、987P、CFAⅠ、 F41 CFAⅡ等 培养特性 大肠杆菌在普通营养琼脂上生长良好，最适生长温度为37℃， 42 ～44 ℃仍能生长。 兼性厌氧菌，氧气充足生长较好。 最适生长pH为6.8 ～8.0，低于6.0或高于8.0生长缓慢。 在普通培养基上的菌落形态 光滑型：菌落边缘整齐，表面有光泽、湿润、光滑，呈灰色，在生理盐水中容易分散。 粗造型：菌落扁平，边缘不整齐，易在生理盐水中自凝。 粘液型：常为含有荚膜的菌株。 生化特征-1 分解乳糖、葡萄糖、麦芽糖、甘露醇、木糖、阿拉伯糖等多种糖类，产酸产气。 在肠道鉴别培养基上形成有色菌落。 吲哚试验、甲基红试验阳性；V-P试验阴性；不能利用柠檬酸盐作为碳源；分解葡萄糖铵盐；不分解尿素；明胶液化阴性；不分解侧金盏花醇；在氯化钾培养基上不生长。 生化特征-2 EIEC：不发酵或迟缓发酵乳糖，不产气，除O124外无动力；乳糖、蔗糖不产酸或产酸，葡萄糖产酸产气或不产气，H2S阴性，靛基质阳性，酒石酸盐阴性，赖氨酸脱羧酶阴性。 O157：H7大肠杆菌不发酵山梨醇或迟缓发酵，在CT-SMAC平板上菌落为白色；绝大多数不具有葡萄糖醛酸酶，不能水解4-甲基伞形花内酯-β-D葡萄糖酸苷，不能产生荧光；绝大多数EHEC发酵棉子糖、卫矛醇，能够利用鸟氨酸赖氨酸，其他大肠杆菌中20%左右发酵棉子糖，50%左右发酵卫矛醇，有部分大肠杆菌不能利用鸟氨酸赖氨酸。 抗原结构 大肠杆菌的表面抗原包括菌体抗原（O抗原）、鞭毛抗原（H抗原）、荚膜抗原（K抗原） O抗原即细胞壁外膜上的脂多糖（LPS），目前已发现O抗原有170多个血清型，H抗原有55种左右。 最初分离的菌株动力往往较差，与H抗血清的反映凝集差，需在半固体培养基上传代以利于鞭毛的生长。 致病物质与所致疾病 在肠道内一般不致病，但如果移位侵入肠道外的组织或器官可引起肠外感染，以化脓性炎症最为多见。 引起泌尿系统感染的大肠杆菌称为泌尿道致病性大肠杆菌（UPEC），引起尿道炎、膀胱炎、肾盂肾炎。 一些大肠杆菌还引起腹膜炎、胆囊炎、阑尾炎、手术创口感染等。在婴幼儿、老年人或免疫力极低的病人中可引起败血症。 肠产毒性大肠杆菌 ETEC是第三世界国家细菌性腹泻和旅游者腹泻的主要病原之一 ETEC分泌耐热肠毒素（ST）、不耐热肠毒素（LT），具有与致病性相关的菌毛等。 ETEC通过菌毛粘附在小肠上皮细胞，释放毒素ST和LT，刺激腺苷环化酶或鸟苷环化酶的生产，引起肠液分泌和聚积，产生水样腹泻。 肠侵袭性大肠杆菌 EIEC的毒力因子和致病机制志贺氏菌基本一致，临床症状与细菌性痢疾不易区分，主要是发烧、腹部剧烈疼痛与不适、毒血症、水样腹泻，粪便中有少量粘液和血。 EIEC通常侵犯大肠，使大肠上皮细胞刷状缘发生局部破坏，细菌被摄入细胞内，侵犯并破坏细胞基底膜，在细胞内扩散、繁殖，并在细胞间扩散，引起细胞的死亡，造成炎症和溃疡。 EIEC的侵袭力由120～140MD的大质粒编码，与编码志贺氏菌侵袭力的大质粒高度同源，丢失了质粒的菌株也随之丧失。 肠致病性大肠杆菌 EPEC是婴幼儿腹泻的主要病原菌，主要临床症状是发烧、呕吐、腹泻，粪便中含有大量粘液而无血，症状可持续两周以上，多引起社区的小型暴发。 主要毒力因子包括50~70KD大质粒编码的束状菌毛介导的粘附作用、噬菌体编码的志贺毒素及LEE毒力岛介导的A/E损伤。 肠出血性大肠杆菌 EHEC是指能引起出血性肠炎的一群大肠杆菌，包括、026:H11、0111:H8、O125：NM、 O122:H19等血清型的部分菌株。 目前认为EHEC的主要毒力因子有志贺毒素、致病性大质粒和LEE毒力岛。 肠聚集性粘附大肠杆菌（EAggEC） EAggEC主要与小儿顽固性腹泻有关 EAggEC产生束状菌毛（AFF/ Ⅰ）和聚集性 粘附大肠杆菌毒素Ⅰ（EAST Ⅰ ） AFF/ Ⅰ和EAST Ⅰ 的基因位于60MD质粒上 样品的采集与处理 肠道外感染患者，应根据感染情况采取中段