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- 2018-12-19 发布于福建
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第章食用菌菌种说的制作
第三章食用菌菌种的制作 二、原种,也称二级菌种 原种鉴定: 洁白,健壮,有凝水,不干燥 三、栽培种,也称三级菌种 栽培种鉴定:洁白,健壮,有凝水,不干燥, 一般不超过25-35天 第二节 培养基 根据各种食用菌生长时对营养物质的要求,用人工方法配制而成的营养基质,供菌丝生长发育,把这种营养物质叫培养基。它如同农作物需要土壤、肥料,动物需要饲料一样。 目前,人们采用的培养基相当多,种类各不相同。不论哪种培养基都有共同特点:一般都含有水分、碳源、氮源、无机盐以及生长因子等。 碳源是构成细胞物质的主要元素,也是食用菌生长发膏所需能量来源。碳源的主要原料是糖类、淀粉、纤维素物质。代表物质是葡萄糖、蔗糖、玉米粉、麸皮、米糠、锯木屑、棉籽壳等。 氮源是食用菌细胞质和细胞核中蛋白质和核酸的主要元素,蛋白质和核酸是生命的基本物质。一切生命活动都离不开这些物质。氮源主要有氨基酸、蛋白胨、尿素、硫酸铵、含有氮素的物质有玉米、棉籽壳。 培养基中的无机盐虽用量不多;但不可缺少,它主要是酶类的组成成分,调节各种生命代谢活动,如磷酸二氢钾、硫酸镁。 生长因子需要量很少,是培养基中的特殊营养物质,它是维持食用菌正常生长所不可缺少的生长因素。如马铃薯、 麸皮、米糠等都含有丰富的生长因子,维生素也属此类。 1.天然培养基:它是利用天然的有机物配制而成的培养基。这种培养基来源广,成本低,很适合实际生产。特别具备营养丰富、制备方便、经济实用等优点。但他学成分不能定量,每批成分也不稳定,因此不宜用来进行精确的科学实验。 常用的天然培养基,有马铃薯培养基、麦芽汁培养基、杏汁培养基、苹果培养基、麦芽培养基、堆肥培养基等。 2.半合成培养基:在天然培养基中,适当增加无机盐类,或在合成培养基中添加少量别的有机物,成为半合成培养基,介于天然培养基和合成培养基之间。主要目的是促进菌丝生长发育。 3.合成培养基:用化学成分已知的有机物或无机物配制而成的培养基。由于各种化学成分已经清楚,容易控制,所以适合某些定性和定量研究。 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA): 马铃薯(去皮)200克 葡萄糖 20克 琼脂 18~20克 PH值 5.5~6.0 制法:先将新鲜无病害的马铃薯洗净,去皮后切成小薄片,称200克,加水1000毫升,煮沸20分钟后过滤,其滤汁为马铃薯煮汁,然后加琼脂和葡萄糖煮溶,后补足水分至1000毫升,装管(瓶)灭菌备用。 一般食用菌母种的分离和培养都适合此培养基。 培养基的灭菌 培养基装好后就要立即进行灭菌;将其中的杂菌杀死,然后才能接入我们所需要的纯菌种,进行培养。 不论是母种分离时用的斜面培养基,还是原种、栽培种瓶培养基或聚丙烯塑料袋培养基,一般都采用热力灭菌法。 高压蒸汽灭菌法: 若是斜面试管培养基,应在1 kg/cm2 (121℃)压力下维持30分钟,即可达到灭菌目的。开锅取试管时,趁热放成斜面。 灭菌材料如是原种和栽培种,应在1.5 kg/cm2 (128℃)压力保持60~90分钟,这样才能达到灭菌目的。 常压蒸汽灭菌法:如没有具备高压锅,可用土蒸锅或蒸笼进行。在常压的条件下,以 100℃的温度持续6~8小时,以杀死培养料中的各种杂菌。 也可采用常压间歇灭菌3次,可先蒸1小时,然后隔24小时又如法蒸1次,连续3次,就可达到灭菌目的。 灭菌效果检验 培养基的灭菌效果要经常检验,是否灭菌彻底:一般情况下,灭菌后的培养基最好应放在要培养的温度下,空白培养1周,可检查灭菌效果。如果在这一段时间内培养基没发生任何变化,说明灭菌效果良好,可以使用。 液体菌种 简言之就是将纯正优良的菌种,接入液体培养基(固体培养基不加凝固剂),使菌丝繁殖形成大量小菌球,然后将这种培养基拌入木屑或棉籽皮料内,制成菌块、培养其形成子实体。还可用于制原种、栽培种。 目前,用液体深层发酵法生产菌种,具有生产量大、周期短、菌龄整齐、成本低廉、接种方便等特点,是实现食用菌工厂化生产的目标。 生产上常用的栽培种 木屑、棉籽壳菌种 麦粒菌种 玉米粒菌种 木块菌种 木筷菌种 牙签菌种 接种技术与环境的消毒 接种箱(接种室) 接种室和接种箱是进行菌种分离接种的场所,和外界空间隔绝,防止空气流动,经过一定的消毒措施后,室内就可达到无菌状态,防止分离和接种时污染杂菌。一般一个接种箱就可展开工作,如有条件也可建一个接种室。 无菌箱及无菌室的消毒灭菌 l.用甲醛和高锰酸钾混合熏蒸:一般每平方米需40%甲醛10毫升、高锰酸钾8毫升,进行熏蒸。使用时,先密闭门窗,量甲醛溶液盛入容器中、然后倒入量好的高锰酸钾,人员随之离开接种室,关紧房门,熏蒸20—30分钟即可。 2.0.1%升汞水消毒:用0.1%升汞水浸过的纱布或海绵进行揩擦,或用喷雾器喷雾灭菌,喷雾后
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