- 1、本文档共6页,可阅读全部内容。
- 2、原创力文档(book118)网站文档一经付费(服务费),不意味着购买了该文档的版权,仅供个人/单位学习、研究之用,不得用于商业用途,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等,侵权必究。
- 3、本站所有内容均由合作方或网友上传,本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺!文档内容仅供研究参考,付费前请自行鉴别。如您付费,意味着您自己接受本站规则且自行承担风险,本站不退款、不进行额外附加服务;查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档,您可以点击 这里二次下载。
- 4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等,请点击“版权申诉”(推荐),也可以打举报电话:400-050-0827(电话支持时间:9:00-18:30)。
查看更多
实验二微生物分离、纯化与接种.doc
实验二微生物的分离.纯化和接种
微生物的分离.纯化
目的要求
1.1 了解微生物分离和纯化的原理
1.2掌握常用的纯化分离微生物的方法
基本原理
从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生 物的分离与纯化。本实验采用平板分离法:该方法操作简便,普遍用于微生物的 分离与纯化。其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养成分、 pH值、温度和溶解氧等要求z或者加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长, 而抑制其它微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物。
微生物在固体培养基生长形成的单个菌落可以是一个细胞繁殖而成的集合 体,因此可通过挑取单菌落而获得一种纯培养。获得单个菌落的方法可通过稀释 涂布平板或平板划线等技术来完成。而纯培养的确定除观察其菌落特征外,还要 结合显微镜检测个体形态特征后才能确定,有些微生物的纯培养要经过一系列分 离与纯化过程和多种特征鉴定才能得到。
本实验将在混合有几种微生物菌液中分离纯化出两种微生物来。
实验材料
3.1培养基
肉汤培养基(固体)。
3.2溶液或试剂
盛4.5ml无菌水的试管,其中有一只盛有玻璃珠。
3.3仪器或其他用具
无菌玻璃涂棒,无菌吸管,接种环,无菌培养皿,涂布器等。
4流程
倒平板一制备梯度稀释液 一?涂布(或划线法)一?培一匕单菌落
保存。
5.1平板划线分离法
5丄1倒平板
倒平板的方法:右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边,用左手将试管塞或 瓶塞轻轻地拔出,试管或瓶□保持对着火焰;然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰 附近打开一缝,迅速倒入培养基约15ml,加盖后轻轻摇动培养皿,使培养基均匀 分布在培养皿底部然后置于桌面上彳寺凝固后即成平板(教材p367图13-14)O 并用记号笔标明培养基名称、菌液编号和试验日期。
5.1.2划线
在近火焰处,左手拿皿底,右手拿接种环,挑取菌悬液一环在平板上划线(教 材p367图13-15)O划线的方法很多,但无论采用哪种方法,其目的都是通过 划线将样品在平板上进行稀释,使之形成单个菌落。
常用的划线方法有:用接种环以无菌操作挑取菌悬液一环,先在平板培养基
的一边作第一次平行划线3-4条,再转动培养皿约70度角,并将接种环上剩余 物烧掉,待冷却后通过第一次划线部分作第二次平行划线,再用同样的方法通过 第二次划线部分作第三次划线和通过第三次平行划线部分作第四次平行划线。划 线完毕后”盖上培养皿盖,倒置于温室培养。
5.1.3挑菌落
同稀释涂布平板法,一直到分离的微生物认为纯化为止。
5.1.4结果判定
所做划线法是否较好地得到了单菌落?如果不是,请分析其原因。
(二)微生物的接种技术
1目的
1.1学习掌握微生物的儿种接种技术
1.2建立无菌操作的概念,掌握无菌操作的基本环节
2实验说明
将微生物的培养物或含有微生物的样品移植到培养基上的操作技术称为接 种。接种是微生物实验及科学研究中的一项基本操作技术。无论微生物的分离、 培养、纯化或鉴定以及有关微生物形态观察及生理研究都必须进行接种。接种的 关键是严格进行无菌操作,如操作不慎引起污染,则实验结果不可靠,影响下一 步工作的进行。
3实验器材 3.1器械和用品 酒精灯,玻璃铅笔,火柴,试管架、接种环、接种针、滴管、移液管、三角型接 种棒等接种工具。
3.2菌种和培养基
菌种:大肠杆菌(Escherichiacol),金黄色葡萄球菌(St叩hylococcus aureus ) 培养基:牛肉膏蛋白月东琼脂培养基
4操作步骤
4.1斜面接种法
斜面接种法主要用于接种纯菌,使其增殖后用以鉴定或保存菌种。
通常先从平板培养基上挑取分离的单个菌落,或挑取斜面,肉汤中的纯培养物 接种到斜面培养基上。操作应在无菌室、接种柜或超净工作台上进行,先点燃酒 精灯。
将菌种斜面培养基(简称菌种管)与待接种的新鲜斜面培养基(简称接种管)持在 左手拇指、食指、中指及无名指之间,菌种管在前,接种管在后,斜面向上管口 对齐,应斜持试管呈45度角,并能清楚地看到两个试管的斜面,注意不要持成 水平,以免管底凝集水浸湿培养基表面。以右手在火焰旁转动两管棉塞,使其松 动,以便接种时易于取出。
右手持接种环柄,将接种环垂直放在火焰上灼烧。镇铸丝部分(环和丝)必须烧 红,以达到灭菌目的,然后将除手柄部分的金属杆全用火焰灼烧一遍,尤其是接 ¥臬¥各丝的螺口部分,要彻底灼烧以免灭菌不彻底。用右手的小指和手掌之间及无 名指和小指之间拨出试管棉塞,将试管口在火焰上通过,以杀灭可能沾污的微生 物。棉塞应始终夹在手中如掉落应更换无菌棉塞。
将灼烧灭菌的接种环插入菌种管内,先接触无菌落生长的培养基上,待冷却后
再从斜面上刮取少许菌苔取出,接种环不能通过火焰,应在火焰旁迅速插入接种 管。在试管中由下往上做S形划线。接种完毕,接
您可能关注的文档
- 学院处级班子述职报告与学院教务处处长述职述廉报告合集.doc
- 学院思想政治工作会议交流演讲材料牢记在心间,落实在言行.doc
- 学院思想政治工作会议交流讲话稿坚持党对学校工作的全面领导.doc
- 学院院长庆祝建国66周年大会发言稿.doc
- 学陶论文“人的现代化”与“持继现代化”思想浅析.doc
- 学雷锋活动总结范文与宁波海曙比特信息技术有限公司办公室文员岗位实习合集.doc
- 学雷锋活动月征文8篇.doc
- 学雷锋活动简报12篇.doc
- 宇妥藏药从三味龙胆花片等产品剂型改进来谈传统藏药的创新与未来.doc
- 守住民族魂培植文化根辽宁省阜新市阜蒙县非物质文化遗产保护中心工作纪实.doc
- GB/T 29324-2024架空导线用碳纤维增强复合材料芯.pdf
- 《GB/T 29324-2024架空导线用碳纤维增强复合材料芯》.pdf
- GB/T 43905.1-2024焊接及相关工艺中烟尘和气体取样的实验室方法 第1部分:电弧焊中烟尘排放速率的测定和分析用烟尘的收集.pdf
- 《GB/T 43905.1-2024焊接及相关工艺中烟尘和气体取样的实验室方法 第1部分:电弧焊中烟尘排放速率的测定和分析用烟尘的收集》.pdf
- 中国国家标准 GB/T 43905.1-2024焊接及相关工艺中烟尘和气体取样的实验室方法 第1部分:电弧焊中烟尘排放速率的测定和分析用烟尘的收集.pdf
- 中国国家标准 GB/T 18910.21-2024液晶显示器件 第2-1部分:无源矩阵单色液晶显示模块 空白详细规范.pdf
- GB/T 18910.21-2024液晶显示器件 第2-1部分:无源矩阵单色液晶显示模块 空白详细规范.pdf
- 《GB/T 18910.21-2024液晶显示器件 第2-1部分:无源矩阵单色液晶显示模块 空白详细规范》.pdf
- GB/T 43860.1220-2024触摸和交互显示 第12-20部分:触摸显示测试方法 多点触摸性能.pdf
- 中国国家标准 GB/T 43860.1220-2024触摸和交互显示 第12-20部分:触摸显示测试方法 多点触摸性能.pdf
文档评论(0)