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- 2018-12-21 发布于福建
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microbe培养发基的制备和高压蒸汽灭菌
培养基的制备和高压蒸汽灭菌 目的与要求 1、了解培养基的配制原理,掌握制备培养基的过程。 2、学习高压蒸汽灭菌操作技术。 3、初步掌握划线和涂布平板的技术。 4、了解抗生素对细菌的抑制作用。 培养基的配制过程 计算用量:200ml固体培养基 称量:托盘天平 溶解:自来水 调pH:自然pH 灭菌: 一般培养基, 121 0C, 15-30min:20min; 含糖培养基: 112 0C, 15-30min; 易产生沉淀的物质:分别灭菌后再混合 倒平板 灭菌 灭菌(Sterilization)是指利用物理、化学等手段杀灭一切微生物的营养体、芽孢和孢子的过程。 倒平板 平板划线的基本程序 连续划线法 每组4人 需要灭菌的东西: 固体培养基200ml(2g蛋白胨,0.6g牛肉膏,1gNaCl,4g琼脂,自来水200ml,自然pH) 培养皿10个(每人倒平板两个,一个划线,一个涂布;涂布的那个用于抑菌圈实验) 1ml移液管4支(每人1支) 滤纸片,每人两片,每组需剪10片,装入培养皿中灭菌 思考题 1、总结一下,配制培养基应注意哪些问题。 2、高压灭菌的关键是什么? 3、加入青霉素滤纸的涂布平板究竟会产生什么样的效果,为什么? (1)加入适量自来水于灭菌锅中(至水位线)。 (2)放入需要灭菌的东西。 注意:不要摆得太挤,以免影响蒸汽流通和灭菌效果。 (3)加盖旋紧螺旋,使蒸汽锅密闭
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