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共结晶和X射线衍射 晶体筛选的准备工作 蛋白样品的准备 蛋白样品PTP1B来源于某某试剂公司，将蛋白质样品于4℃，12,000 rpm离心1min，加液时取上清与池液(Wellbuffer)混合。 结晶试剂盒的准备 分别用Indexl-96、Crystal screen、Crystal screenⅡ、SaltRx、WizardⅠ、WizardⅡ、WizardⅢ、PEG ion、PEGRx-1、PEGRx-2和Natrix约600个条件进行晶体生长的初筛。 PTP1B/HPN 复合物晶体培养及优化 结晶实验均采用悬滴气相扩散法在4℃、10℃、22℃各温度恒温下进行，根据初筛结果根据初筛结晶结果对环境温度、盐类种类、蛋白浓度、沉淀剂浓度、缓冲液种类以及pH值等多种结晶条件来进行优化得到可以衍射的晶体。对于得到的复合物晶体可进行初步的x射线衍射，根据分辨率大小确定晶体质量以便改变筛选条件以达到优化目的。 晶体生长条件初筛所用蛋白浓度为10mg/ml,蛋白所在缓冲液为MES 50mM pH6.5,NaCI 100mM。使用准备的结晶试剂盒进行晶体生长条件的初筛，晶体初筛时生长第一周中第1、3、7天进行观察，第二周后隔周观察一次蛋白质结晶情况，通过悬滴优化以获得更高分辨率的蛋白质晶体。优化结晶条件一般采用三个步骤:在初筛最佳晶体条件附件，作pH和沉淀剂浓度的