食管鳞癌史中ajuba突变的分子机制及临床意义-临床医学专业毕业论文.docxVIP

摘要 摘要 实验背景：食管癌是世界第八大肿瘤，占据肿瘤导致死亡的第六位，其中绝大部分 食管癌的病理类型为鳞癌，但是食管鳞癌的五年生存率只有不足15％，近年来总生 存期也没有明显的延长，这跟目前缺少有效的治疗有关。随着高通量测序技术的发 展，在多个食管鳞癌队列当中发现AJUBA基因突变，而相关研究是匮乏的，探索 AJUBA突变在食管鳞癌发生发展中的分子机制及临床意义，可能改善患者的预后， 提供新的治疗靶点。 实验方法：本论文收集了五个食管鳞癌的队列，共545例患者，都有临床信息及全 外显子组测序数据，通过统计学分析AJUBA突变与患者TNM分期的相关性，分别绘 制AJUBA突变型与野生型患者的Kaplan—Meier曲线，通过Log-Rank比较两者是否 有显著差异，以获得可能的AJUBA突变的临床意义，指导进一步的机制探索及临床 应用。同时，运用293T细胞包装慢病毒，慢病毒感染目的细胞构建可供研究AJUBA 突变的稳转细胞系，这包括稳定敲降的细胞系，过表达野生型AJUBA的细胞系及过 表达突变型的细胞系，通过流式荧光分选、潮霉素／嘌呤霉素进行筛选，RT-PCR及 蛋白印迹进行验证。在构建细胞系基础上，进行CCK-8、Transwell细胞功能实验， 体外验证AJUBA突变与细胞增殖、迁移及侵袭的关系。 实验结果：在545例患者当中，AJUBA突变型及野生型的TNM分期没有显著差