高效液相色谱在制药行业中应用.pptVIP

example 60%乙腈，进样量4‰时，收率为36.3% 60%乙腈，进样量3‰时，收率为78.9% 选择上样量为3 ‰ 从分析到制备的过程：案例 最终确定的制备条件： 流动相：60%乙腈-水 上样量：填料质量的3‰ 填料：XX牌-C8-10um-100A 样品溶剂：流动相 从分析到制备的过程：案例 5step: 放大 分析柱模拟制备的条件及上样量等线性放大到制备柱上 重复几次，至工艺成熟后，可以每次将主峰只分为4-6段 将主峰分段收集，一般为分成10段左右 分别测定纯度，计算回收率，进一步优化制备条件 公式见前面，制备柱规格根据实际样品量来决定 从分析到制备的过程：案例 100DAC中试放大 从分析到制备的过程：案例 工业化制备系统纯化最终药物 从分析到制备的过程：案例 从分析到制备的过程：案例 纯化后的样品分析谱图 从分析到制备：5要素 1）制备的目的是在一次操作中尽 可能地多上样，所以，首先得 在分析柱上实现超载，否则， 分析柱分离得再漂亮，再在制 备柱中线性放大时就因为成本 不合理而被无情地否决。 2）制备的目的是分离你所关心的组分，只要它能与其它杂质分离的好就行了，所以不要希望在分析柱上先得到所有组分的基线分离，完全没有必要！ 3）制备中常常因为超载而无法使目的物与邻近杂质间达到基线分离，可以采用分段收集的方法得到指定纯度的目的物，要求越纯，单次操作的得率也越低。 4）制备中因为目的物来之不易，常常需要将纯度不合格的目的物重新上柱循环。由于重新上柱是会增加成本的，所以超载的量要平衡单次操作的纯品得量和效益与返工成本，以单位纯品数量进行成本核算，以优化最佳上样量。 联系方式：张浩 zhanghao@ 高压输液泵的选择 平流（单泵） 高压梯度 使用多台色谱泵，在泵后混合 配置灵活、简单，脱气简单 低压梯度 用单泵产生梯度，泵前混合 对脱气要求高 检测器的选择 a、紫外可见光检测器 应用最广泛的检测器，是在UV及VIS区有吸收物质检测的首选检测器。 b、示差折光检测器 一种通用型的检测器，灵敏度偏低，对温度稳定性要求过高，不 能用于梯度洗脱。通常用来分析糖类及高聚物（GPC） c、荧光检测器 灵敏度极高，常用来进行痕量检测。 d、二极管阵列检测器（DAD） 可用于全波长的检测，可以测量峰纯度，可在线得到色谱图和光谱图。 e、蒸发光散射检测器 一种通用型检测器，它可以检测挥发性低于流动相的任何样品。ELSD可以用于测量无生色团物质的检测，如碳水化合物、类脂物、聚合物、不进行衍生化的脂肪酸及氨基酸、表面活性剂及结构不明又无标准的物质的检测。 根据分离模式划分的色谱柱类型 色谱柱的选择 常用色谱柱类型 1.ODS（C18）—应用范围最广的填料，大部分小分子有机化合物都可进行分析 2.C8、C4—保留要比C18弱，适合用于大分子的多肽和蛋白类的分离纯化 3.氨基柱—正反双模式，主要用于小分子糖类化合物 4.苯基柱—通常用于分离含苯环的化合物 5.氰基柱—正反双模式，和ODS基不同的色谱间作用力，因而氰基柱拥有独特的选择性 6.正向硅胶 7.环糊精—根据物质光学性质的不同进行手性分离 进样系统的选择 六通进样阀 六通阀的构造 a. Load状态 b. Inject状态 自动进样器 为保证重现性以及峰形等，很多情况下需要使用柱温箱来控制柱温。 选配：恒温装置 引言： HPLC的特点 HPLC在制药行业中的应用 药物色谱分析方法的开发 药物色谱纯化方法的建立和优化：从分析到工业制备 目 录 内容提要 药物色谱纯化方法的建立和优化：从分析到工业制备 理论的放大 设备的放大 分析型色谱：线性色谱 指组分在固定性和流动相中的平衡浓度呈正比例关系，即吸附（分配）等温线为一条直线。 用于分离和鉴别样品中的组分，为此希望能在尽可能小的进样量下，提供尽可能高的组分分辨率。 制备色谱：非线性色谱 在制备色谱中，进样量一般都比较大，例如在克量级范围，这时样品在流动相和固定相中的比例不再是正比例的关系，相对应的吸附（分配）等温线将发生弯曲。 用于分离、富集或纯化混合物中的某一或某些组分，为此需要一定的处理量，一般进样量比分析型色谱大得多。能有适当的分离度，并要考虑层析分离过程的规模、速率和分离成本。 理论的放大：非线性色谱 线性色谱 分析 制备 非线性色谱 理论的放大：非线性色谱 制 备 色 谱 峰 型 理论的放大：非线性色谱 色谱峰型不再对称 色谱峰的保留时间随着进样浓度而变化 色谱峰高度（峰面积）与 进样浓度不成正比