实验二 利用高效液相色谱测定混合样品中苯和.pptVIP

实验二 利用高效液相色谱测定混合样品中苯和甲苯 一、目的要求 1．掌握高效液相色谱定性和定量分析的原理及方法； 2. 了解高效液相色谱的构造、原理及操作技术； 3．熟悉建立分析方法的基本思路。 二、仪器和试剂 岛津液相色谱仪LC-10AT、SPD-10A紫外-可见光检测器、CDT-10AS贮温箱、C18色谱柱、微量注射器10ul； 溶液：苯标准液；甲苯标准液； 苯、甲苯混合标准溶液： 三、操作步骤 1、最佳分离条件的选择 启动仪器，先注入5微升的甲醇流动相，观察检测器当峰斜率小于1000是，设定流动相甲醇含量为60%，注入5微升的苯与甲苯混合液，观察检测器显示的两峰的保留时间及分离效果。双峰显示完毕后，改变流动相甲醇含量为80%，观察检测器显示的两峰保留时间及分离效果。 2．苯、甲苯定性分析 在最佳分离条件下，用10μL微量注射器，分别注射5.0μL苯、甲苯的标准溶液，观察记录保留时间，确定苯和甲苯的峰 3．苯、甲苯定量分析 在最佳的分离条件下，用10μL微量注射器，分别注射5.0μL的0.2μL/m L、2μL/m L、4μL/m L、10μL/m L的混合标准溶液（各重复实验2次），再分别测定苯和甲苯的峰面积，求出平均值，以峰面积对浓度作图，作出标准曲线。 在最佳的分离条件下，