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- 2023-05-30 发布于重庆
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(4)粒子介导DNA转移 基因枪法(gene gun)是依赖高速的金属微粒将外源基因导入活细胞的一种转化技术。 其基本原理是将外源DNA包被在微小的金粒或钨粒表面,然后在高压的作用下微粒被高速射入受体细胞或组织。微粒上的DNA进入细胞后整合到植物染色体上得到表达,从而实现基因转化。 是继农杆菌介导法之后的第二大基因转化法。 在禾本科作物上应用较广泛 第六十二页,共九十五页。 基因枪法转化的优点有: 无宿主限制:农杆菌介导法只对双子叶植物敏感,限制了它的应用范围。而基因枪没有物种限制。 靶受体类型广泛:可以是原生质体,叶片,悬浮细胞,茎或根切段,种子胚,愈伤组织,花粉等。 操作简单快速 但该方法转化率低,外源DNA整合机理不清楚。应该说该技术只处在研究阶段,尚未成熟。 第六十三页,共九十五页。 3.种质转化系统法 种质转化系统是以植物自身的生殖系统种质细胞为受体进行的转化,如花粉浸泡外源DNA、DNA注射受粉后的子房等; 花粉管通道法:利用植物在受精和胚发育初期接受外源DNA的敏感性 1.外源DNA转化花粉 2.自花授粉后,下柱头,外源DNA滴在柱头,沿花粉管道进入胚囊,转化受精前后的卵细胞 第六十四页,共九十五页。 常用植物基因转化方法特点比较 转化方法 农杆菌法 PEG法 电击法 微针注射法 基因枪法 花粉管通道法 受体材料 完整细胞 原生质体 原
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