生物化学课件（杨洋）2核酸结构与功能2.ppt

三叶草型结构特点 （1）氨基酸臂：由7个碱基对组成，含G较多，3’-CCA-OH 连接氨基酸； （2）双氢尿嘧啶环（DHU环）：由8~11个核苷酸组成；含 DHU (二氢脲嘧啶) ； （3）反密码环：由7个核苷酸组成，中间3个相邻的核苷酸 组成反密码子，与mRNA上密码子配对； （4）额外环（可变环）：由3~18个核苷酸组成，不同的 tRNA此环大小不等，是tRNA的分类标志； （5）T?C环：由7个核苷酸组成，含胸苷、假尿苷、胞苷 可能与AA特异结合相关 反密码子环 反密码子 载运氨基酸 tRNA三叶草型二级结构特点 四. 核糖体RNA（rRNA）的结构与功能 21种 原核 真核 小亚基 rRNA 蛋白质 rRNA 蛋白质 大亚基 16 S 18 S 33种 5S，23S 5S，5.8S ， 28S 49种 34种 大 小 30 S 40 S 大 小 50 S 60 S 核糖体 大 小 70 S 80 S rRNA+ 蛋白质 核糖体 核糖体的组成 核糖体的功能：蛋白质合成的场所 五. 其它小分子RNA (snmRNAs) 核内小RNA （snRNA) 核仁小RNA (snoRNA) 胞质小RNA（scRNA) 催化性小RNA (small catalytic RNA) 小片段干扰RNA (siRNA) 功能：参与hnRNA和rRNA的转运和加工 核酶 (ribozyme) 某些RNA分子具有自我催化能力，可以完成 rRNA的剪接，称核酶。 1982，T.R.Cech，四膜虫rRNA加工 第五节 核酸的理化性质和应用 一、核酸的酸碱性质 核酸通常显酸性，在中性或偏碱性条件下带负电荷 电泳：由负极向正极泳动 沉淀：盐溶液中金属离子中和负电荷 二、核酸的高分子性质 粘度大 核酸发生变性或水解时，粘度变小 不同种类的核酸分子其分子量不同，形状不同 分离：电泳、凝胶过滤、超速离心 三、核酸的紫外吸收 核酸分子中的碱基都有共轭双键，具有紫外吸收性质 吸收峰在260nm,可用于核酸的定量 四、DNA的变性、复性与杂交 在某些理化因素作用下，DNA 分子互补碱基对之间氢键断裂， DNA双螺旋打开，变为单链。 概念 因素 加热、酸、碱、有机溶剂 理化性质改变 高色效应（A260增加） 粘度降低 比旋度下降 变性 （一）核酸变性 变性后其它理化性质变化： 粘度下降 DNA双螺旋是紧密的刚性结构，变性后转化成柔软而松散的无规则单股线性结构，因此粘度明显下降。 比旋度下降 变性后整个DNA分子的对称性及分子构型改变，使DNA溶液的旋光性发生变化。 OD260增高 增色效应(hyperchromic effect)：指DNA变性后其紫外吸收 明显增强的效应。 减色效应：DNA复性时，其溶液OD260降低。 在DNA双螺旋结构中碱基藏入内侧，变性时DNA双螺旋解开，于是碱基外露，碱基中电子的相互作用更有利于紫外吸收，故而 产生增色效应。 DNA变性的本质：维持双螺旋稳定性的氢键断裂，碱基间的堆积力遭到破坏，但不涉及到其一级结构(磷酸二酯键)的改变。 DNA的热变性 加热引起的DNA变性 DNA解链或溶解 解链温度（melting temperature, Tm） DNA加热变性时， A260为最大值的一半时的解链温度。 Tm = 69.3+0.41(%G+C) Tm = 4(G+C)+2(A+T) (20bp) A260 解链温度（oC） Tm * * * 第二章 核酸的结构与功能 Structure and Function of Nucleic Acid 核 酸(nucleic acid) 是以核苷酸为基本组成单位的生物大分子，携带和传递遗传信息。 二. 核酸的种类、分布和功能 分布于细胞核（98％），线粒体，叶绿体， 质粒。 分布于胞核、胞液（90％）。 (deoxyribonucleic acid, DNA) (ribonucleic acid, RNA) 脱氧核糖核酸 核糖核酸 携带遗传信息，决定细胞和个体的基因型(genotype)。 参与细胞内DNA遗传信息的表达。某些病毒RNA也可作为遗传信息的载体。 第二节 核酸的化学组成 一. 核酸的元素组成 C　Ｈ　Ｏ　Ｎ　Ｐ 二. 核酸的基本结构单位—核苷酸 RNA：8.5% ~ 9% DNA：9% ~ 10% P含量最稳定 9 ~10% 核酸 核苷酸 磷酸 核苷