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TUNEL细胞凋亡检测试剂盒 (显色法)
产品编号 产品名称 包装
C1091 TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(显色法) 20次
产品简介:
碧云天生产的显色法TUNEL细胞凋亡检测试剂盒(Colorimetric TUNEL Apoptosis Assay Kit)为您提供了一种高灵敏度又快速
简便的细胞凋亡检测方法。对于待检测的细胞或组织样品,经过生物素标记和后续的DAB显色等步骤,即可在普通光学显
微镜下观察到凋亡细胞。
细胞在发生凋亡时,会激活一些DNA 内切酶,这些内切酶会切断核小体间的基因组DNA 。细胞凋亡时抽提DNA进行电泳检
测,可以发现180-200bp 的DNA ladder 。基因组DNA 断裂时,暴露的3-OH 可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal
Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上生物素(Biotin)标记的dUTP(Biotin-dUTP),随后和辣根过氧化物酶(HRP)标记
的Streptavidin (Streptavidin-HRP)结合,最后在HRP 的催化下通过DAB显色来显示凋亡细胞,从而可以通过普通光学显微镜
检测到凋亡的细胞,这就是TUNEL(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling)法检测细胞凋亡的原理。
本试剂盒有如下优点。(1) 高灵敏度:背景染色极低,阳性染色强,可以在单细胞水平检测到细胞凋亡,同时由于凋亡早期
就有DNA断裂,可以检测到早期的细胞凋亡。(2) 特异性好:TUNEL检测时通常更容易标记凋亡细胞,而不容易标记坏死
细胞。(3) 快速:仅需约2-3个小时即可完成。 (4) 应用范围广:可以用于检测冷冻或石蜡切片中的细胞凋亡情况,也可以
检测培养的贴壁细胞或悬浮细胞的凋亡情况。(5) 实测效果好:参考图1。
图1. 本试剂盒的检测效果图。A. HeLa细胞未处理或用DNase I室温孵育10分钟后的检测效果图。B. Hela细胞未处理或用
10μM喜树碱(Camptothecin)处理24小时后的检测效果图。图中棕褐色为DAB染色阳性细胞。本图中的染色实验均在12孔板中
进行。本图仅作参考,不同的样品不同的检测条件,实际获得的结果可能和上图有较明显的差别。
TUNEL法特异性检测细胞凋亡时产生的DNA断裂,但不会检测出射线等诱导的DNA断裂(和细胞凋亡时的断裂方式不同) 。
这样一方面可以把凋亡和坏死区分开,另一方面也不会把射线等诱导发生DNA断裂的非凋亡细胞判断为凋亡细胞。
极少数细胞凋亡时没有DNA断裂,此时不适用TUNEL法检测。在个别类型的坏死细胞中也发现TUNEL检测呈阳性。在需要
严格判断细胞凋亡的情况下,最好同时检测多个凋亡指标。
本试剂盒足够检测20个样品。
包装清单:
产品编号 产品名称 包装
C1091-1 TdT酶 100μl
C1091-2 Biotin-dUTP
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