实验6：α相淀粉酶固定化.pptVIP

“α淀粉酶固定化及淀粉水解作用的检测”实验步骤 1、α淀粉酶的固定化。5mg α淀粉酶溶于4ml蒸馏水，加入5g石英砂，搅拌30min 2、将石英砂装入含气门心并用夹子封住的注射器中。用40ml蒸馏水用流速1ml/min来洗涤除去未吸附的游离淀粉酶 3、使淀粉溶液以0.3ml/min的流速过柱，在流出5ml后接收0.5ml流出液。加入1-2滴KI-I2溶液，观察颜色变化。 实验预期结果： 水解产物糊精遇碘呈红色. * ａ淀粉酶的固定化及 淀粉水解作用的检测 一 、酶的生产 ①提取法 定义：采用一定的技术直接从动植物或微生物的组织、细胞中将酶提取出来 缺点： 要有充足的原材料，广泛应用受到限制 ③发酵法——常用方法 定义：通过微生物发酵获得所需要的酶。 优点： 易培养、繁殖速度快、便于大规模生产。 ②化学合成法 缺点： 成本高、已知分子结构的酶 知识介绍 二 、酶的特点 ①天然酶通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活 ②溶液中酶很难回收，不能再次利用，提高了生产成本 ③反应后，酶会混在产物中，影响产品质量，难以在工业生产中广泛应用 固定化酶：将水溶性的酶用物理或化学的方法固定在某种介质上，使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。 三、 酶的固定化方法 1、物理吸附法： 将酶吸附到固体吸附剂表面的方法，固体吸附剂多为活性碳、多孔玻璃等 2、包埋法： 将酶包裹在多孔的载体中，包埋成格子型或包埋成微胶囊型 酶 物理吸附法 交联法 包埋法 酶的固定化方法 一种酶只能催化一种化学反应，而在生产实践中，很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的 酶既能与反应物接触，又能与产物分离，同时，固定在载体上的酶还可以被反复利用 固定化酶 对环境条件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本；反应后酶会混在产物中，可能影响产品质量. 催化效率高，低耗能、低污染等 直接使用酶 不足 优点 类型 直接使用酶和固定化酶的优缺点 实验原理：用吸附法将a-淀粉酶固定在石英砂上，一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示剂溶液测试，流出物呈红色表明水解产物糊精生成. 淀粉 α-淀粉酶 糊精 β淀粉酶 葡萄糖 糖化淀粉酶 麦芽糖 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色 枯草杆菌 a-淀粉酶的固定化 可溶性淀粉溶液 KI-I2溶液 反应柱 固定化酶 气门心 夹子 5ml注射器 筛板 淀粉 收集流出液，鉴定