TLC板技术经验交流.ppt

Nature 1965 208, p71 - 72 nBuOH/Pyridine/H2O=1/1/1 L-isomer D-isomer nBuOH/Pyridine/H2O=1/1/1 L-isomer D-isomer * 纯 度? 状 态? 合 理? 可 行? TLC用途 * 监测反应进程: 反应有无新点产生 原料有无剩余，剩余多少 反应是否干净 综合判断反应如何处理 Note： 点样量 b.检测时间 c.留样对照 d. 重要板留存 * 反应物加完应立即检测；反应中出现变化（温度，颜色，气体、沉淀）立即检测 反应物加完后半小时内应检测，然后适时跟踪检测 快速反应的体系（如硝化、还原），在短时间内需要检测 过夜反应，过夜前后应检测 检测时机 * 极性增大: NO2?NH2 RNH- Bn (Boc, Cbz) ? RNH2 X ?-NH、CN R-S-R’ ? R-SO-R’ CHO（ R-X ）?CH2OH ?CO2H 官能团转化 极性大 极性小 极性相近的： R=R ??R-R CHO ??C=C 极性减小: OH?X (Cl, Br, I) COOH?CO2R , R-SO-R’ ? R-SO2-R’ -NH2(-OH) ? NH-R ,(OH- R ,) * TLC组合判断 TLC-HPLC/LC-Ms联用（定性和定量） TLC-MS联用(适用于拿标样点） TLC-NMR联用（确认结构） TLC MS NMR LCMs/HPLC * 后处理情况 EA H2O 固体的纯度和母液的取舍 Solid Mother solution 萃取是否有效 * 摸索柱层析洗脱条件 Note: Rf值在0.2左右的展开剂比例为洗脱剂的合适值 过柱时组分流出顺序未必和TLC上点极性顺序一致 Desired product 梯度洗脱 * 制备TLC 展 开 刮板 洗 脱 点 板 显 色 * 制备TLC Note: 1 溶剂: 极性小, 溶解性好，易挥发 2 上样量: 40-60mg 3 上样的位置: 距离两端大约1cm, 距离底边大约2cm. Note: 上样时如果上的色带太宽或不齐 可用大极性溶剂预展开 2~3 cm * TLC常见问题 两个点离的太近怎么办？ 如果有酸碱基团我们需要如何处理？ 有强酸或者强碱的反应体系TLC跟踪反应需注意那些方面，同理有固体或者两相反应时如何处理？ TLC爬板为什么有时会爬歪? 如何提高TLC效率？ 板展开后，溶剂前沿的点是一个点吗？原点上的点是一个点吗？ * * * * * TLC薄层层析技术 Thin-Layer Chromatography * 一、 TLC简介 二、操作过程 三、 扩展及用途 四、问题讨论 主要内容： 背景：薄层色谱法(Thin-Layer Chromatography,简称TLC）是Kirchner等人在五十年代从经典柱色谱法及纸色谱法的基础上发展起来 的一 种 色 谱技术。六 十年代后，Stahl等人 对薄层色谱法的标准化、规格化及扩大应用等方面进行了许多工作，使该法日趋成熟。 2010年版中国药典一部有3341项鉴别采用TLC法 分类：按薄层色谱使用的固定相的性质及其分离机制可分为 吸附薄层、分配薄层、离子交换薄层及分子排阻薄层 背景和分类 * 原理: 利用吸附剂(硅胶)对样品中各组分 吸附能力 不同，及展开剂对它们的解吸附能力 的不同，使各组分达到分离的目的。 特点：微量、快速、简单、节省 一般认为TLC是一种定性和半定量的方法 原理和特点 * 操作过程 氧化铝 有弱碱性 pH=9、酸性pH=4及中性pH=7.5三种氧化铝。弱 碱性氧化铝用来分离中性或碱性化合物；中性氧化铝适用于酸 性及对碱不稳定的化合物的分离；酸性化合物可用酸性氧化 铝分离。 硅藻土、纤维素、葡聚糖凝胶等 化学键合固定相（C18、C8 等） 薄层板 硅胶 表面带硅醇基（－Si－OH），呈弱酸性 (pH=4.5)，活性硅胶适合分 离酸性或中性化合物，如酚类、有机酸、醛类、甾体化合物以及 氨基酸类，是基于吸附作用；非活性硅胶含有一定的水，在分离 色素时是基于分配作用。 硅胶G: 是含有13％煅石膏（gypsum）黏合剂的硅胶 硅胶H：不含黏合剂的硅胶 硅胶HF254：不含黏合剂，含有一种无机荧光剂（如锰激活的 硅酸锌），在254nm波长紫外光下呈强烈黄绿色荧光 硅胶GF254：含有煅石膏黏合剂，含荧