江苏-生物-专题一--基因工程1(第一课时).docVIP

专题1 基因工程 1.1 DNA重组技术的基本工具 学习目标： ①简单描述基因工程的概念及目的。 ②说出DNA重组技术的三个工具及各工具的特点和用途。 ③利用DNA重组技术的工具解答有关题目。 重难点：DNA 重组技术所需要的三种基本工具的作用；基因工程载体需要具备的条件 学习过程： 活动一、基因工程的概念 基因工程是指按照 ，进行严格的设计，并通过 DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。由于基因工程是在 水平上进行设计和施工的,因此又叫做 。 活动二、认识DNA重组技术的基本工具 1.“分子手术刀”—— 2.“分子缝合针”—— 3.“分子运输车”—— (一)限制性核酸内切酶 来源：主要是从 中分离纯化出来的。 功能：能够识别双链DNA分子的某种 核苷酸序列，并且使每一条链中 部位的两个核苷酸之间的 断开，因此具有 性。大多数限制酶的识别序列由 个核苷酸组成。 经限制酶切割产生的DNA片段末端是怎样的？ 经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式： 和 。前者是限制酶在它识别序列的 将DNA的两条链切开产生的，后者是限制酶在它识别序列的 切开产生的。 (二) DNA连接酶 分类：根据酶的来源不同，可分为两类：一类是从 中分离得到的，称为 ；另一类是从 中分离出来的，称为 。 两种DNA连接酶的比较： （1）相同点：都缝合 键。 （2）区别：E·coliDNA连接酶只能将双链DNA片段互补的 之间连接起来，而不能将双链DNA片段 之间进行连接；而T4DNA连接酶既可以“缝合”双链DNA片段互补的 ，又可以“缝合”双链DNA片段的 。但连接平末端的之间的效率较 。 DNA连接酶与DNA聚合酶的比较： （1）相同点： （2）区别： (三) 基因进入受体细胞的载体 1.载体具备的条件： （1） （2） （3） 2.基因工程中使用的载体有： 、 和 等。其中最常用的是 。质粒：是一种 的、 、 ，并具有 能力的 。 选择“限制酶”的注意点： （1）若只针对“目的基因”来说，应选择切点位于目的基因两端的限制酶，而不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲中可选择PstI，不能选择SmaI （2）若只针对“质粒”来说，作为载体必须具备标记基因等组分，因此所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因1， ECOR I会破坏标记基因2 （3）若同时针对“目的基因”和“质粒”来说，则 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。 ②为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲、乙也可选择用Pst和EeoRⅠ两种限制酶同时切割目的基因和质粒。 根据基本概念的理解，判断下列说法是否正确 (1)限制酶只能用于切割目的基因(　　) (2)切割质粒的限制性核酸内切酶均能特异性地识别6个核苷酸序列(　　) (3)DNA连接酶能将两碱基间通过氢键连接起来(　) (4)E·coli DNA连接酶既可连接平末端，又可连接黏性末端(　　) (5)限制酶也可以识别和切割RNA(　　) (6)限制性核酸内切酶、DNA连接酶和质粒是基因工程中常用的三种工具酶(　　) (7)载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因(　　) (8)每个质粒DNA分子上至少含一个限制酶识别位点(　　) (9)质粒是小型环状DNA分子，是基因工程常用的载体(　　) (10)载体的作用是将携带的目的基因导入受体细胞中，使之稳定存