蛋白质的性英质实验1.pptVIP

2009.10-12 医药学院生物化学实验课件 中国海洋大学医药学院 实验一 蛋白质的性质实验 实验目的 1. 加深理解所学有关的蛋白质性质的理论知识 2. 掌握氨基酸和蛋白质常用的定性、定量分析的方法及原理 实验原理 一、蛋白质呈色反应 二、蛋白质沉淀反应 一、蛋白质呈色反应 蛋白质的呈色反应是指蛋白质所含的某些氨基酸及其特殊结构，在一定条件下可与某些试剂发生了生成有色物质的反应。不同蛋白质分子所含的氨基酸残基不完全相同，因此所发生的成色反应也不完全一样。 呈色反应并不是蛋白质的专一反应。因此，不能仅仅根据呈色反应的结果为阳性就来判断被测物质一定是蛋白质，至少要用2种以上的方法来鉴别。 蛋白质呈色反应 （一）米伦氏反应 （二）双缩脲反应 （三）蛋白黄反应 （四）茚三酮反应 （一）米伦氏反应 蛋白质溶液中加入米伦试剂(亚硝酸汞、硝酸汞及硝酸的混和液)，蛋白质首先沉淀，加热则变为红色沉淀，此为酪氨酸的酚核所特有的反应，因此含有酪氨酸的蛋白质均呈米伦反应。 （二）双缩脲反应 当尿素经加热至180℃左右时，两分子尿素脱去一分子氨，进而缩合成一分子双缩脲。其在碱性条件下双缩脲与铜离子结合成红紫色络合物，此反应称为双缩脲反应。 蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用呈现紫红色，此类似反应也称蛋白质的双缩脲反应。凡分子中含有两个以上肽键的化合物都呈此反应，故所有蛋