蛋白的分离和纯化-开栗晓霞.pptVIP

蛋白质的分离和纯化 Isolation and Purification of Proteins 营养与食品卫生 栗晓霞 蛋白质的意义 蛋白质是各种生物有机体的重要组成部分。是生命的物质基础之一。机体的很多活性物质如酶、多肽激素、抗体、核蛋白都是蛋白质，它们参与重要的生命活动。蛋白质也就成为揭示生命活动现象和分子生物学机理的重要研究对象。研究蛋白质首要步骤就是将目的蛋白从复杂的大分子混合物中分离纯化出来，得到高纯度的有生物活性的目的蛋白。因此高效的分离纯化技术是蛋白质研究的重要基础和关键之一。 蛋白质的提取 1.材料的选择原则 含较高质量的所需蛋白 来源方便 2.组织细胞的破碎 高速组织捣碎：将材料配成稀糊状液，放置于筒内约1/3体积，盖紧筒盖，将调速器先拨至最慢处，开动开关后，逐步加速至所需速度。此法适用于动物内脏组织、植物肉质种子等。 玻璃匀浆器匀浆：先将剪碎的组织置于管中，再套入研杆来回研磨，上下移动，即可将细胞研碎，此法细胞破碎程度比高速组织捣碎机为高，适用于量少和动物脏器组织。 超声波处理法：用一定功率的超声波处理细胞悬液，使细胞急剧震荡破裂，此法多适用于微生物材料，此法的缺点是在处理过程会产生大量的热，应采取相应降温措施。 反复冻融法：将细胞在-20度以下冰冻，室温融解，反复几次，由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀，使细胞结构