临床免疫学检验质量保证.pptVIP

方法学性能验证 实验方案 实验计划 实验实施 实验报告 标准操作规程的建立 在免疫测定中，试剂准备、加样、温育、洗板、显色和测定等每一步骤均可能对测定结果产生较大影响 因此，需要将每个操作步骤标准化并形成“标准操作程序”（SOP），所有操作人员必须按照SOP进行试验操作 加样 ◎在ELISA中一般有3次加样步聚，即加标本，加酶结合物，加底物。 ◎加样应用微量移液器（加样枪)按规定的量加入微孔板的1/3处避免加在孔壁上部，并注意不可溅出，不可产生气泡。 ◎每次加样应更换吸嘴，做到一人一吸头，以免发生交叉污染;干吸头预先在血清中抽吸三次。 加样 ◎样本稀释，目的是为了减少非特异性反应，所以一定要先加稀释液后加样本，特别注意加样后要在微量振荡器上振荡30秒钟，同时注意防止液体溢出。如后面操作步骤中加二种以上试剂时均需振荡混匀。 ◎如用滴瓶滴加试剂应先将滴瓶摇匀并挤去第一滴有气泡的试剂后加样。 ELISA竞争法的本质：酶标抗体与样本抗体在同样体系中，与固相抗原竞争结合是等比例关系。 正确的加样：应该先将样本与酶标抗体混合均匀，然后加入孔中反应。 实际