生(中)药概论实验指导.docVIP

实验一 药用植物细胞的基本结构和代谢产物 (一) 一、实验目的 1．掌握植物细胞的基本结构。 2. 认识植物细胞中常见后含物的种类及鉴定方法。 3. 学习临时装片法的基本技术。 4. 学习显微化学鉴定技术。 二、实验材料与设备 1、实验材料与试剂 洋葱鳞茎、马铃薯块茎、半夏粉末. 2、实验设备与工具 显微镜、擦镜纸、镊子、载玻片、盖玻片、单面刀片、双面刀片、吸水纸。蒸馏水、碘—碘化钾溶液、培养皿、吸水纸、纱布块、酒精灯、温台。碘．碘化钾溶液、苏丹Ⅲ酒精溶液、水合氯醛试剂、稀甘油、稀碘液、浓硫酸、蒸馏水。 三、实验内容和方法 (一)用洋葱鳞叶表皮观察植物细胞的基本结构 1．制作洋葱鳞叶表皮临时装片 （1）将载玻片和盖玻片擦干并在载玻片中央加一滴水或稀蔗糖水溶液。 (2)取材 剥去洋葱鳞茎外部的老鳞叶。取一片鲜嫩的鳞叶，用单面刀片将表皮划破成边长约3—5mm的小块，用镊子撕下表皮小块并将其浸入载玻片上的水滴中，再用镊子和解剖针将材料展平。 (3)加盖玻片制成临时装片。 2．观察植物细胞的基本结构 将洋葱鳞叶表皮临时装片放在显微镜载物台中央，用低倍物镜观察，可见洋葱鳞叶表皮好象—个网状结构，每一个“网眼”即是一个细胞。洋葱鳞叶表皮是由一层细胞构成的。转动标本推动器移动装片，选择几个清楚的细胞置于视野中央，换用高倍物镜仔细观察一个植物细胞的基本结构，识别下列各部分： (1)细胞壁 细胞壁是位于植物细胞最外层的一个坚韧的外壳，是植物细胞特有的结构。由于细胞壁比较透明，因此只能看到细胞的侧壁。两个相邻细胞之间的细胞壁实际上有三层，即各个细胞的初生壁和连结两个相邻细胞的胞间层。但由于普通光学显微镜难以分辨胞间层，故在显徽镜下观察时，两个相邻的细胞间好象只有一层细胞壁。 (2)细胞核 在光学显微镜下可观察到细胞中有一个圆形或椭圆形的小球体，该小球体就是细胞核。在成熟的植物细胞中，由于中央大液泡的形成，细胞核总是位于细胞的边缘，紧贴着细胞壁。当细胞核贴近细胞的侧壁时，只能见到它的窄面(呈椭圆形)；当细胞核贴近细胞的上下面壁时，就可以看到核的宽面(呈圆形)，因此，细胞核实际上是扁圆形的小球体。在细胞核中还可以看到一至三个核仁。 (3)细胞质 充满于细胞核和细胞壁之间的物质是细胞质。细胞质包括质膜、胞基质和细胞器三部分。质膜是位于细胞质最外部的一层膜，由于它很薄，通常又紧贴细胞壁，因此，在光学显微镜下较难观察到正常细胞的质膜。如果实验中采用高浓度溶液处理材料，使原生质体失水收缩，与细胞壁发生分离(即质壁分离)，就可以看到质膜的外面。胞基质是看不出特殊结构的细胞质部分，细胞器就包含在胞基质中。在显微镜下能观察到的洋葱鳞叶表皮细胞中的细胞器有白色体和中央大液泡。胞基质中有一些无色透明的小颗粒就是白色体。中央大液泡位于细胞中间，占居细胞的绝大部分体积，把胞基质和其它细胞器挤成紧贴细胞壁很薄的一层，因此，细胞质的中间部分较亮，边缘部分较暗。成熟韵植物细胞具有中央大液泡是植物细胞与动物细胞重要区别之一。 为了更好地观察植物细胞的基本结构，在观察完新鲜的洋葱鳞叶表皮细胞之后，可用碘—碘化钾溶液染色，使细胞核和细胞质的形态更为清晰。染色时可先将盖玻片取下，用吸水纸把材料周围的水分吸去，然后滴加一滴碘—碘化钾溶液，加上盖玻片即可观察。也可不移动盖玻片，仅在其—侧滴上一滴染剂，在盖玻片的另一侧用吸水纸吸去盖玻片下面的水分，把染剂吸入盖玻片下，使材料着色，用这种方法有时染色不均匀。染色后，细胞核呈深黄色，细胞质呈淡黄色。 （二）淀粉粒的观察与鉴定 1、马铃薯块茎的薄壁组织细胞中充满了淀粉粒，是观察淀粉粒的良好实验材料。取一小块马铃薯块茎，用刀片从切面处刮取少量破裂细胞流出的白色液汁或将材料切成薄片，制成临时装片进行观察。在低倍物镜下可看到许多大小不等的椭圆形和球形颗粒，这些颗粒就是淀粉粒。转换高倍物镜并调节细准焦旋钮和虹彩光圈进行观察，可见淀粉粒中有偏向一侧的核心，该核心称为脐点。围绕脐点有许多明暗交替的轮纹。马铃薯块茎中有三种类型的淀粉粒，即单粒淀粉粒、复粒淀粉粒和半复粒淀粉粒。单粒淀粉粒只有一个脐点，有许多轮纹围绕这个脐点；复粒淀粉粒有二个以上的脐点，各脐点分别有各自的轮纹环绕；半复粒淀粉粒也有二个以上的脐点，但各脐点除有自己的轮纹环绕外，外面还包围着共同的轮纹。在马铃薯块茎中单粒淀粉粒最多，复粒和半复粒淀粉粒很少。 观察并绘完淀粉粒图后，取下临时装片，在盖玻片一侧加一滴稀碘—碘化钾溶液，用吸水纸从盖玻片的另一侧吸引，将碘—碘化钾溶液吸人盖玻片下，可见淀粉粒变成蓝色。这种显微镜观察和化学反应相结合，用以鉴定细胞或组织内物质性质的方法称为显微化学鉴定技术。 注：在制作临时装片或观察时，不要挤压盖玻片，以免把淀粉粒压