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实用标准文案 精彩文档 鸡(Gallus gallus) IFNγ基因重组蛋白 复性条件的优化及生物活性鉴定 摘要：本文用18种不同的复性缓冲液对表达纯化的cIFNγ进行复性处理，通过SDS和对鸡胚成纤维细胞和鸡胚的保护实验检测复性产物的得率和生物学活性。研究结果表明：去污剂和疏水剂能保证蛋白的复性得率和复性效率，重组表达产物得率可高达94.7%；氧化还原电势对是cIFNγ成功复性的关键，有生物学活性的复性产物的复性液中均含有氧化还原对GSSG/GSH；经去污剂处理后再复性的产物对保护细胞的有效浓度显著低于直接复性的蛋白。 关键词：鸡重组干扰素γ；复性条件；生物学活性 IFNγ属于Ⅱ型干扰素，又称免疫干扰素，是在特定诱生剂的作用下由多种细胞产生的具有高度生物活性的可溶性糖蛋白，是一种重要的细胞因子[1]。IFNγ在抵抗哺乳类和鸟类病原侵染中具有重要的作用，对肿瘤[2]、细菌[3]、病毒[4]以及寄生虫[5]等具有多重抵抗作用。目前研究已证实鸡IFNγ对流感病毒、新城疫病毒[6]，马立克氏病毒[7-9]，鸡劳氏肉瘤病毒[10]等具有较好的抑制作用，它不仅参与机体对病原侵害的保护性应答，还可通过细胞的信号通路广泛参与包括调节机体MHC II成熟、抗原呈递等在内的免疫调节，是机体内重要的免疫增强剂[11]。 鸡的IFNγ基因由4个外显子和3个内含子组成，其开放性阅读框有495个碱基，编