基因型都鉴定心得.pptx

培训心得之基因型鉴定;基因型鉴定基本步骤;DNA提取;;;;动物基因型检测记录表;;DNA提取的总流程;裂解液的配方 蛋白酶K（PK）：储存浓度：10mg/ml；终浓度100ug/m; -20℃保存。 储存液可以事先配制好，蛋白酶K要现用现配。 配制列子：10ml裂解液 Tris-HCl 1ml EDTA 100ul NaCl 667ul SDS 200ul 蛋白酶K 100ul 10000ul(10ml)-1967ul=8033ul水 ;提取具体步骤;PCR鉴定;引物设计;条件摸索;常见问题;;;PCR中对照组的设立;Cre 一种重组酶，可由噬菌体转染到细胞，催化Loxp位点间的DNA进行特异性重组。 Loxp 34bp序列，两端是13bp的反向重复序列，中间是其定向作用的8bp间隔区。 重组产物 根据loxp位点的位置和相对方向而不同，在一条链上单loxp位点的DNA将被融合。 ;Flp-Frt system:主要用来去除Neo;;;;PCR过程中各种对照组的选择;;;获得条件性基因敲除/敲进小鼠;;;;获得fl纯合子小鼠;