Cyanothece+51142染色体复制起始区的预测与验证.pdfVIP

2.3.3 阳性重组子的鉴定 30 2.4 本章小结 33 第三章 复制起始蛋白 GST-DnaA 与 DnaA(IV) 的表达与纯化 34 3.1 实验材料 34 3.1.1 菌株 34 3.1.2 实验主要试剂 34 3.1.3 实验器材 34 3.1.4 培养基、溶液的配制及其灭菌方法 34 3.2 实验方法 36 3.2.1 基因工程菌的生长曲线及 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白的性质 36 3.2.2 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白诱导条件的确定 37 3.2.3 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白的表达纯化 38 3.3 实验结果 41 3.3.1 基因工程菌的生长曲线及 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白的性质 41 3.3.2 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白诱导条件的确定 43 3.3.3 GST-DnaA 与 DnaA(IV)蛋白的纯化 44 3.4 本章小结 47 第四章 复制起始蛋白与复制起始区结合性实验 48 4.1 实验材料 48 4.1.1 DnaA(IV)蛋白 48 4.1.2 实验主要试剂 48 4.1.3 实验器材 48 4.1.4 培养基、溶液的配制及其灭菌方法 48 4.2 实验方法 49 4.2.1 ori C 区的扩增 49 4.2.2 引物设计及退火 50 4.2.3 EMSA 验证 ori C 与 DnaA(IV) 的结合 51 4.3 实验结果 52 4.3.1 线状及环状染色体 ori C 的扩增 52 4.3.2 EMSA 验证 ori C 与 DnaA(IV)蛋白的结合 53 4.4 本章小结 57 第五章 结论与展望 58 5.1 结论 58 2 5.2 展望 59 参考文献 60 发表论文和参加科研情况 64 致 谢 65 3 第一章 文献综述 第一章 文献综述 1.1 原核生物染色体 DNA 复制 现代生物学的发展已经充分证明，DNA 是生物间保持遗传特性的物质基础， 是生物性状从亲本向子代传递的载体。所谓 DNA 复制，就是以亲本 DNA 分子 为模板，在碱基互补配对原则指导下，进行子代 DNA 分子的合成。生物体的遗 传特性在 DNA