酶活性的测定分解.pptVIP

过氧化物酶(ＰＯＤ)活性的测定　　　　　　　　—愈创木酚法;二、材料和设备;三、实验步骤;２、过氧化物酶活性的测定 酶活性测定的反应体系包括:2.9ml 0.05mol/L磷酸缓冲液、1.0ml 2%H2O2、1.0ml 0.05mol/L 愈创木酚和0.1ml酶液。 以在沸水中加热5min的酶液为对照，做二组重复实验。反应体系加入酶液后，立即于37℃水浴中保温15min，然后迅速转入冰浴中，并加入2.0ml 20%三氯乙酸终止反应。然后，过滤(或5000g 离心10min),滤液适当稀释，用751型分光光度计在470nm波长下测定反应体系的吸光度。;四、实验结果;CAT过氧化氢酶活性测定方法;;过氧化氢酶的应用：;过氧化氢酶的测定：;高锰酸钾滴定法：;; ;方法比较： 研究认为，化学滴定法重复性差、紧密度低、操作繁琐、检测线低，不适于大批量的样品测定。其优点是不需要任何特殊的仪器，适用性比较广泛。 紫外分光光度法具有重现性好，操作简单、快速、检测线相对较低得到优点。但是对于测定底物或产物改变量方面不太准确。 ; 总结：;抗坏血酸过氧化物酶（APX）活性测定 ——在茶叶中;实验原理;APX酶液的制备;APX活性的测定;计算公式;测定茶树鲜叶APX活性的