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胰岛素的制备.ppt

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    1．5％低熔点琼脂糖凝胶电泳回收PCR产物，然后用EcoR Ⅰ和BamHⅠ 双酶切，回收后与pJGl03(含B—C—A人胰岛素原基因)载体大片段连接(经EcoR Ⅰ和BamHⅠ双酶切后回收)，转化大肠杆菌感受态细胞DH5α． 1．2．2 质粒pJGll2的筛选和鉴定 酶切筛选：将转化出的单菌落采用常规小量质粒制备方法制备质粒DNA，取1μg DNA，用EcoR I和BamH I双酶切后进行1．5％琼脂糖凝胶电泳，凡有约380bp片段出现的重组克隆作序列分析鉴定． 温度诱导表达筛选：挑取转化的单菌落，37 ℃培养过夜，次日

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