实时定量PCR全套解决方案.PDFVIP

08-08 Nucleic Acid Purification Kit MagExtractor -Plant Genome- （Code No.：NPK- 500,501 ） 使用说明书 研究用 TOYOBO CO., LTD. Life Science Department OSAKA JAPAN 目 录 1．前言 1 2 ．使用前须知 1 3 ．试剂盒中所包含的物品 2 4 ．操作程序 3 ［1］试剂盒需要的其他物品 3 ［2 ］抽提流程 4 ［3 ］样品前处理 5 ［4 ］使用MFX-2000 进行Plant DNA抽提 6 ［5 ］使用手动法进行Plant DNA抽提 10 5 ．一般样品的分析 11 ［1］DNA定量 11 ［2 ］电泳 11 ［3 ］PCR 11 6 ．抽提实例 12 7 ．疑难解答 13 【 注意 】 本试剂盒中所包含的所有试剂为研究用试剂。请不要用于诊断或临床等场合。 在使用本试剂盒的时候，请严格遵守常用的实验室安全操作程序。 Hoffman-La Roche Ltd.拥有PCR方法的专利权。 1．前言 MagExtractor-Plant Genome-利用在 Chaotrpic （盐）的情况下，DNA 吸附于 硅胶表面的特性，进行 Plant DNA 的抽提。本试剂盒与自动核酸抽提装置 MFX-2000 并用，可简便地从植物叶及植物培养细胞等植物样品中抽提出高纯度 的Plant DNA 。另外，本试剂盒也可用作手动抽提用试剂盒而加以使用。 特征 ·本试剂盒用于从植物标本如培养细胞和叶子以及其它植物组织中进行DNA 抽提。 ·无需进行乙醇沉淀，可以实现快速抽提。 ·不使用苯酚。 ·不使用RNase 。 ·所抽提的DNA 被回收到 TE 缓冲液中，可以被直接用于 PCR 或者其它分 析方法。 2 ．使用前须知 ·MagExtractor-Plant Genome-适用于以下样品： 对应样品 样品量 主要用途 植物标本，如叶子以及培养细胞 0.01 到 0.1g PCR 参见第十页“6. 抽提实例”。 ·有关溶解液的储存 由于本试剂盒是在低温下进行储存以及运输，因此溶剂中的表面活性剂成分 将有所沉淀。按照以下的步骤，请在室温（20~30 ℃）下进行相应的溶解以及储 存。从溶剂的表面上看，有些情况下可能没有任何沉淀出现，但是，可能已形成 了透明凝块，故在使用之前，务必进行以下操作。同样，如果在储存期间产生沉 淀，也进行相同的操作并进行溶解。其它试剂请在 4 ℃下进行储存。 （参照第 2页“[3] 试剂盒中包含的物品”。） 1 东洋纺（上海）生物科技有限公司 （1）在50℃的水浴下，加热 10 分钟。 （2 ）轻轻地上下转动瓶子以溶解沉淀的凝块。（剧烈摇动会形成泡沫。） （3 ）在50℃的水浴下中，再次加热 5 分钟。 （4 ）轻轻地上下转动瓶子以进行完全溶解。 如果在溶液中仍然有一些未溶解的部分，则在水浴下中再次加热 5 分钟并上 下转动混合直到未溶解的部分完全被溶解。 （可能会形成透明凝块，请进行两次检查以确保完全溶解。） ·建议在室温（20~30 ℃）下使用本试剂盒。低温会导致溶剂成分的沉淀可能会影响 本试剂盒的性能。