第三章酶(第八版本科药学本科).pptVIP

* 二、酶作为试剂用于临床检验和科学研究 （一）有些酶可作为酶偶联测定法中的指示酶或辅助酶 （二）有些酶可作为酶标记测定法中的标记酶 （三）多种酶成为基因工程常用的工具酶 * * * * （二） 可逆性抑制剂与酶非共价键结合 抑制剂通常以非共价键与酶或酶-底物复合物可逆性结合，使酶的活性降低或丧失；抑制剂可用透析、超滤等方法除去。 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 * 类型 １.竞争性抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心 反应模式 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 + I EI E + S E + P ES I S * 特点 抑制程度取决于抑制剂与酶的相对亲和力及底物浓度； I与S结构类似，竞争酶的活性中心； 动力学特点：Vmax不变，表观Km增大。 抑制剂↑ 无抑制剂 1/V 1/[S] * 举例 丙二酸与琥珀酸竞争琥珀酸脱氢酶 琥珀酸 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸 COOH COOH CH 2 丙二酸 COOH CH 2 CH 2 COOH 磺胺类药物的抑菌机制 与对氨基苯甲酸竞争二氢叶酸合成酶 二氢蝶呤啶 ＋ 对氨基苯甲酸 ＋ 谷氨酸 二氢叶酸 合成酶 二氢叶酸 SO 2 NHR H 2 N 磺 胺 类 药 物 有些抑制剂与酶活性中心外的基团相结合，不影响酶与底物的结合，酶和底物的结合也不影响酶与抑制剂的结合。底物和抑制剂之间无竞争关系。但酶-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步释放出产物。这种抑制作用称作非竞争性抑制作用。 非竞争性抑制剂结合酶活性中心之外的调节位点 定义 * 反应模式 E+S ES E+P + S － S + S － S + ESI EI E ES E P + I EI+S EIS + I * 特点 抑制剂与酶活性中心外的必需基团结合，底物与抑制剂之间无竞争关系； 抑制程度取决于抑制剂的浓度； 动力学特点：Vmax降低，表观Km不变。 抑制剂↑ 1 / V 1/[S] 无抑制剂 反竞争性抑制剂的结合位点由底物诱导产生 抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物(ES)结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出游离酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。 定义 * 反应模式 E+S E+P ES + I ESI + + E S ES ESI E P * 特点： a)抑制剂只与酶－底物复合物结合； 抑制程度取决与抑制剂的浓度及底物的浓度； 动力学特点：Vmax降低，表观Km降低。 抑制剂↑ 1/V 1/[S] 无抑制剂 ? 各种可逆性抑制作用的比较 动力学参数 表观Km K m 增大 不变 减小 最大速度 V max 不变 降低 降低 林-贝氏作图 斜率 K m / V max 增大 增大 不变 纵轴截距 1/V max 不变 增大 增大 横轴截距 - 1/K m 增大 不变 减小 与I结合的组分 E E、ES ES 作用特征 无抑制剂 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 六、激活剂可加快酶促反应速率 激活剂: 凡能使酶由无活性变为有活性或使酶活性增加的物质。如： 金属离子： Mg 2+ 、 K+、 Mn2+ 阴离子： Cl- 有机物： 胆汁酸盐 分类： 必需激活剂：如，Mg 2+ 对己糖激酶 非必需激活剂：如，Cl- 对淀粉酶 酶活性的调节（快速调节） 酶含量的调节（缓慢调节） 调节方式 调节对象 关键酶 第 四 节 酶 的 调 节 一、酶活性的调节是对酶促反应速率的快速调节 （一）别构效应剂通过改变酶的构象而调节酶的活性 别构调节 一些代谢物可与某些酶分子活性中心外的某部分可逆地结合，使酶构象改变，从而改变酶的催化活性，此种调节方式称别构调节。 别构效应剂 (allosteric effector) 别构激活剂 别构抑制剂 别构酶 (allosteric enzyme) 别构部位 (allosteric site) 变构酶常为多个亚基构成的寡聚体，具有协同效应 变构激活 变构抑制 变构酶的Ｓ形曲线 [S] V 无变构效应剂 在其他酶的催化作用下，某些酶蛋白肽链上的一些基团可与某种化学基团发生可逆的共价结合，从而改变