薄层色谱 第三章..ppt

气相色谱仪器（GC） 气相色谱结构示意图 高效液相色谱仪（HPLC） 高效液相色谱结构示意图 b. 停滞流动相中的传质阻力 存在于颗粒内部孔隙中的流动相，不随主体流动，故称为停滞流动相 式中： --- 与颗粒微孔中被流动相所占据部分 的分数及与容量因子有关的常数 联合上述四项影响色谱区带宽化的因素： 对于气－液色谱， 不存在，则： GC：溶质在气相流动相中传质快，流动相 传质阻力可以忽略，一般采用只有三项的简化VanDeamter方程式： 上两式均称为速率理论方程式，可以简写为 3.4.3 速率理论方程式的偶合式 Giddings以严格的科学方法证明影响塔板高度的各种因素不是独立，而是相互关联的。 涡流扩散和流动相传质效应相互偶合形成 偶合涡流扩散项Hem 3.4.4 速率理论方程式的讨论 （1）流速对塔板高度H的影响 曲线的最低点H最小，以Hmin表示，柱效能 最高。该点对应的流速称为最佳流速： GC曲线与LC曲线不同的原因： Dm大，当 低时，分子扩散项 影响显著。 (2)固定相颗粒 的影响 固定相粒度大小对板高的影响 粒度越细，板高越小，受线速度影响亦小 3.5 影响谱带扩宽的其他因素 1.非线性色谱 速率理论假定分配等温线是线性的，在实际工作中，经常遇到的是非线性等温线。 2.活性中心的影响 载体或吸附剂表面的活性中心对组分的吸附力太强，使组分迟迟不得释放而造成拖尾 解决办法： ①将载体进行预处理，去除表面的活性中心； ②在LC中，在流动相中加入缓和剂。 3.柱外效应 进样的方式和进样技术，以及进样器、检测器、连接管的死体积造成的谱带扩宽，称为柱外效应。 进样器 色谱柱 检测器 柱外效应常用柱外效应引起峰体积的相对增大值作为量度指标： 柱内宽化服从速率理论方程 柱外某连接管溶质的宽化为： 式中， d:连接管内径(0.25-0.3mm) L:连接管的长度 Fc 流动相体积流速 死体积愈小，柱外宽化愈小，一般控制不超过 总宽化的10%。 3.2.5 基本保留方程式 组分在柱内的移动速度取决于组分在两相中的分配： 组分在固定相时，迁移速度 组分在流动相时，迁移速度 有保留组分谱带的迁移速度 设色谱柱长L 对于溶质分子: 对于流动相分子: ( 可从色谱图直接测定） 若用保留体积 代替 ，则 因为： 基本保留方程式 所以: ② 因为保留值与β有关,装置改变时保留值不同. 色谱基本保留方程式的物理意义: 组分的保留值取决于组分的KD和色谱体系的相比β, 色谱装置 (VM与Vs)一定时,相比β一定,组分保留值取决于KD(组分的本性),故可作为定性的依据; 3.3 塔板理论（Plate theory） —詹姆斯/马丁（1941） 塔板理论是色谱学中的热力学平衡理论。组分在色谱柱中的分配行为，可用类似于精馏塔的的塔板理论加以描述。这种半经验的理论处理，与实验结果基本吻合。 精馏塔是利用各组分的沸点不同，在塔板上经过多次气-液平衡后，最终低沸点组分在塔顶流液的含量高，高沸点组分在塔低层含量高，而达到分离目的。 小室1 小室2 小室3 小室4 小室1 小室2 小室3 小室4 塔板理论四个理想的假设： 2 流动相从柱入口每次以一个△V的体积不连续进入; 3 组分的KD 在所有的塔板上均为常数; 4 忽略塔板间的纵向分子扩散. 1 在柱内一小段长度H内，组分在两相中瞬间达到分配平衡，这一小段柱称为一个“理论塔板”，它的长度称为理论塔板高度; 流动相 H n H H＝ L n 根据以上假定的条件，讨论组分在两相间的移动分配过程， 假设： (2) 加入柱内的流动相脉冲塔板数N; (1) 色谱柱由5块理论塔板组成，塔板号r＝0，1，2，3，4; (3) 当加入一个塔板体积△V脉冲流动相到0号塔板时，原来塔板中流动相中的组分就依次冲到 下一个塔板，并在两相间重新分配并达到平衡. (4)塔板上流动相的组分数为q，固定相中的组分数为p 经过N次转移后，分配在各塔板上的组分数符合二项式分布： (p+q)N p和q可以从组分的分配比来计算确定。 若组分A的kA’=2.0 (p=0.667 , q=0.333), 组分B