铜绿假单胞菌课件.ppt

铜绿假单胞菌 概况 铜绿假单胞菌（P.Aeruginosa）原称绿脓杆菌。在自然界分布广泛，为土壤中存在的最常见的细菌之一。各种水、空气、正常人的皮肤、呼吸道和肠道等都有本菌存在。本菌存在的重要条件是潮湿的环境。 铜绿假单胞菌形态为直或稍弯、两端钝圆的杆菌，大小0.5～0.8μm×1.5～3.0μm。有1～3根单端鞭毛，运动活泼。临床分离的菌株常有菌毛和微荚膜，不形成芽胞。革兰染色阴性。专性需氧菌。在普通培养基上生长良好，菌落大小不一，平均直径2mm～3mm，扁平，边缘不整齐，且常呈相互融合状态。由于本菌产生水溶性色素，使培养基被染成蓝绿色或黄绿色。在血琼脂平板上菌落较大，有金属光泽和生姜气味，菌落周围形成透明溶血环。在肉汤中形成菌膜，肉汤澄清或微混浊, 菌液上层呈绿色。培养在pH8.0的碱性环境中，有自溶现象。 铜绿假单胞菌是假单胞菌属的代表菌种，在琼脂平板上能产生蓝绿色绿脓素，感染伤口时形成绿色脓液。最适宜生长温度为35℃ －37℃，致病性铜绿假单胞菌在42℃时仍能生长，据此可与荧光假单胞菌等进行鉴别，本菌生长对营养要求不高。 菌体0抗原有两种成分，一为内毒素蛋白，是一种保护性抗原，另一为酯多糖，具有特异性，根据其结构可将铜绿假单胞菌分成12个血清型，此外还可利用噬菌体或铜绿假单胞菌素分型。 铜绿假单胞菌对外界环境抵抗力较强，在潮湿处能长期生存，对紫外线不敏感，湿热55℃ 1小时才被杀灭。 G- 致病菌标本来源分布 7年间最常见的革兰氏阴性菌（株数） 呼吸道常见G-致病菌 连续7年度分离的最常见的革兰阴性菌（株数） 铜绿假单胞菌的问题 院内获得性 呼吸机相关性肺炎的首位病因 引起的菌血症死亡率70% 所有广谱抗菌素对其耐药已升高至20~37% 铜绿假单胞菌 是一种临床上最常见的引起严重院内获得性感染的 条件致病菌，广泛分布于自然界中，存在于正常人的 皮肤、肠道和呼吸道等处。因其易定植、变异、天然 耐药和耐药机制的复杂性等特征，使其成为临床抗 菌治疗中亟待解决的难题。且随着近年抗生素、免疫抑制剂、肿瘤化疗等药物的广泛应用，多重耐药铜绿假单胞菌的数量和耐药率不断上升。其在各大医院细菌分离率调查中均居于首要位置。 2001年常用抗菌素对铜绿假单胞菌活性 耐药机制 基因改变与耐药 PA基因组上结构基因的突变、插入或缺失是导致多药耐药的分子生物学基础。由细菌自身基因突变而引起的耐药不能传播,但大多细菌的耐药可以在菌间进行转移,因此认为大多数细菌耐药是由获得外源耐药基因引起的。结构基因的改变可以导致以下的几种情况：①使细菌表达水解酶或钝化酶水解或修饰抗菌药物而使抗菌药物失活。②药物作用靶位发生改变,不能与药物结合或亲和力降低。③细菌外膜蛋白发生改变,如数量减少,或孔道变小,导致细胞膜通透性降低, 药物不能进入细菌体内。④主动外排机制增强, 使药物在细菌体内不能形成有效的杀浓度。⑤形成生物膜。 产生灭活酶 产生β内酰胺酶　PA对β内酰胺类抗菌药物产生获得性耐药的主要机制是产生β内酰胺酶。它能够破坏渗透入菌体内的β内酰胺类抗生素的活性。β内酰胺酶的产生可以是染色体依赖的,也可以是质粒介导的,即获得性耐药。由于获得性耐药是引起耐药菌流行的主要方式,尤其引起人们的高度重视。 β内酰胺酶的种类繁多,功能也不尽相同。按分子生物学分类可分为A、B、C、D 四类,其中A、C、D类以丝氨酸为基础的机制发挥作用,而B 类作用时需要锌的参与,又称为金属酶 产生氨基糖苷类钝化酶 PA产生氨基糖苷类钝化酶是多重耐药的机制之一。氨基糖苷类抗生素通过阻止RNA 与核糖体结合,阻断敏感蛋白的合成,破坏细胞膜的完整性,对繁殖期和静止期细菌均有作用。氨基糖苷类钝化酶通过对药物的基团进行修饰,使药物失活。 改变药物的作用靶点 抗生素作用靶点在微生物生长与存活中起重要作用。很多抗生素就是通过作用于这些作用靶点干扰细菌的生长来发挥抗菌活性。如：拓扑异构酶Ⅱ、Ⅳ是氟喹诺酮类抗生素的主要作用靶点。氟喹诺酮类药物通过形成DNA2拓扑异构酶2氟喹诺酮类药物三元复合物,阻止DNA拓扑异构变化,妨碍细菌DNA复制、转录,以达到杀菌的目的。 青霉素结合蛋白( Penicillin2B inding2p roteins, PB2Ps)是位于细菌细胞内膜上的一些膜蛋白,是β内酰胺类抗生素的专一性作用靶点,最初因为能与青霉素共价结合而得名。PBPs是参与细菌细胞壁肽聚糖生物合成的酶,包括转肽酶、羧肽酶和内肽酶。它的正常存在是细菌保持正常形态及功能的必需条件。β内酰胺类抗生素正是通过与PBPs结合抑制细菌细胞壁的生物合成引起细菌细胞死亡从而发挥杀菌作用[ 22 ] 。当细胞膜上的PBPs数量减少,或者PBPs的结